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文檔簡介
1、癩葡萄(MomordicaCharantiaL.Var.abbreviateSer)為葫蘆科(Cucurbitaceae)苦瓜屬植物苦瓜的一個(gè)變種。癩葡萄具有明顯的降血糖功效,經(jīng)研究,癩葡萄皂苷是其主要的降血糖活性成分之一。本文旨在研究癩葡萄皂苷的提純工藝,為工業(yè)化生產(chǎn)提供借鑒。在此基礎(chǔ)上,研究了癩葡萄皂苷的結(jié)構(gòu)組成,探索了癩葡萄皂苷元的水解方法,得到了初步的苷元組成,對比了皂苷元與皂苷的降血糖活性。對癩葡萄皂苷單體進(jìn)行了分離純化和結(jié)構(gòu)
2、鑒定。 首先,對癩葡萄皂苷的提純工藝進(jìn)行了系統(tǒng)研究,通過靜態(tài)吸附、動(dòng)態(tài)吸附以及動(dòng)態(tài)洗脫實(shí)驗(yàn),確定了大孔吸附樹脂AB-8分離純化癩葡萄皂苷的最佳工藝條件為:上樣液濃度為5-5.5mg.mL-1,上樣液pH值為5,上樣液鹽濃度(KCl)為9mg·mL-1,上樣液流速為2Bv·h-1,用乙醇進(jìn)行梯度沈脫,收集不同梯度下乙醇的沈脫液,可得到初步分離的癩葡萄皂苷組分。直接用95%的乙醇洗脫,洗脫液流速為2By·h-1,收集4個(gè)柱體積,可得
3、到純化的癩葡萄總皂苷,得率可達(dá)90.1%,皂苷純度為77.8%。 采用C18填料進(jìn)一步分離純化,得到了一種癩葡萄皂苷單體,經(jīng)核磁共振譜圖分析,推測其為葫蘆烷-5-烯-3β,22,23,24,25-四羥基-3-O-3-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-D-吡哺葡萄糖苷。 為了進(jìn)一步得到癩葡萄皂苷的結(jié)構(gòu)組成,本文對癩葡萄皂苷元進(jìn)行了初步研究。確定了癩葡萄皂苷元的檢測方法,比較了皂苷元不同的水解方法,采用直接酸水解法可得到純度較高
4、(苷元百分含量為75.6%)的癩葡萄皂苷元。通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析(LC/MS),檢測出六種主要的皂苷元組成,其中三種皂苷元的分子量與已報(bào)道的苦瓜皂苷元I、齊燉果酸以及β,7β,23-trihydroxy-cucurbita-5,(23E)-dien-19-al的分子量相同,一種皂苷元與后續(xù)分離純化得到的皂苷單體的苷元分子量相同。TLC法快速檢測癩葡萄皂苷元結(jié)果顯示,癩葡萄皂苷元的最佳展開劑條件為:氯仿:石油醚在1.5:8.5-2.5
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