羅漢果甜苷對(duì)肝星狀細(xì)胞的影響及其作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究MOGS含藥血清對(duì)HSC-T6的毒性、增殖和抑制纖維合成的影響，并探討其抗肝纖維化的作用機(jī)制。
　　方法：設(shè)5％、10%和20%三個(gè)MOGS含藥血清劑量組，設(shè)細(xì)胞培養(yǎng)中大鼠血清含量為20%，不足的量用生理鹽水大鼠血清補(bǔ)齊。體外培養(yǎng)大鼠肝星狀細(xì)胞（HSC-T6），進(jìn)行以下試驗(yàn)：
　　1、體外培養(yǎng)HSC-T6細(xì)胞，并以MOGS含藥血清干預(yù)。乳酸脫氫酶（LDH）法檢測(cè) MOGS含藥血清對(duì) HSC-T6的細(xì)胞毒性；MTT法

2、檢測(cè)MOGS含藥血清對(duì)HSC-T6的生長(zhǎng)抑制作用。
　　2、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期分布及細(xì)胞凋亡的變化。
　　3、Hyp測(cè)試盒測(cè)定細(xì)胞上清液中Hyp含量，放射免疫法測(cè)定細(xì)胞上清液中HA和LN含量。
　　4、RT-PCR法測(cè)定其對(duì)Col-I、TGF-β1及TIMP-1 mRNA表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：1、乳酸脫氫酶檢測(cè)結(jié)果顯示，MOGS含藥血清對(duì)HSC-T6無(wú)特異毒性，MTT法檢測(cè)結(jié)果表明，MOGS含藥血清20%和

3、10%濃度組可顯著抑制HSC-T6的增殖（P<0.05或P<0.01）。
　　2、MOGS含藥血清各劑量組作用48 h后，HSC-T6細(xì)胞周期產(chǎn)生明顯變化，與NSs組對(duì)比均有顯著性差異（P<0.01）。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡發(fā)現(xiàn)，與NSs組相比，MOGS含藥血清各濃度組對(duì)HSC-T6細(xì)胞凋亡的影響皆有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01），且正常細(xì)胞比例呈劑量依賴(lài)性下降。
　　3、細(xì)胞上清液中相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，MOGS含藥血清各濃度組細(xì)胞

4、上清液中 Hyp含量與 NSs組比較均存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01）；MOGS含藥血清20%和10%濃度組細(xì)胞上清液中HA和LN含量與 NSs組比較存在顯著性差異（P<0.05或 P<0.01），而5%濃度組對(duì)HA和LN含量無(wú)明顯影響（P>0.05）。
　　4、RT-PCR對(duì)HSC-T6相關(guān)基因的測(cè)定結(jié)果顯示，與NSs組比較，MOGS含藥血清20%和10%濃度組對(duì)Col-I、TGF-β1及TIMP-1 mRNA表達(dá)均