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文檔簡介
1、 本實驗室以往工作已確定了約31.3kb的依博素生物合成基因簇(GeneBankAccessionNumber:AY131229),其中包含22個開放閱讀框(ste1-ste22),序列分析發(fā)現(xiàn)其中六個開放閱讀框參與了核苷酸糖前體的合成(ste6,ste10,ste1l,ste16,ste17andste19),四個開放閱讀框可能為糖基轉移酶(ste5,ste7,ste15,ste22)編碼基因。 為了進一步證明ste6參與依博素
2、的生物合成,我們通過同源交換對基因ste6進行了基因阻斷實驗,分別構建了基于同源單交換的重組質粒pLH1327和同源雙交換的重組質粒pLH1327,對鏈霉菌139進行轉化,分別獲得ste6阻斷突變株LH9827和LH9828,通過Southern雜交證明ste6基因被成功阻斷。我們同時還構建了用于回復實驗的質粒pLH9828,對同源雙交換阻斷突變株鏈霉菌LH9828進行轉化得到ste6回復株LH9829。對突變株和回復株產生的胞外多糖進
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