可皮下注射2-甲氧雌二醇植入劑的研究.pdf

1、2-甲氧基雌二醇（2-Methoxyestradiol,2-ME）是17β-雌二醇在體內(nèi)的天然代謝產(chǎn)物。大量體內(nèi)外研究表明，2-ME對(duì)包括乳腺癌、前列腺癌、肺癌、宮頸癌等在內(nèi)的55種實(shí)體腫瘤的生長(zhǎng)都有抑制作用。目前，其前臨床研究主要用于乳腺癌和前列腺癌的治療。由于2-ME存在水溶性極低，口服有肝首過(guò)效應(yīng)，半衰期短，體內(nèi)分布廣泛和生物利用度低等缺點(diǎn)，臨床試驗(yàn)結(jié)果不滿(mǎn)意，因此急需開(kāi)發(fā)新制劑以滿(mǎn)足臨床需要。有些研究者將2-ME制成脂質(zhì)體、納米

2、混懸劑、亞微乳等靜注劑型，納米晶體、膠囊等口服劑型，但這些均為短效系統(tǒng)給藥劑型，難以避免藥物的全身分布和較高的給藥劑量，本文欲探索2-ME局部藥治療乳腺癌和前列腺癌的可行性。盡管已有研究者將2-ME開(kāi)發(fā)為注射的直徑為0.8mm的圓柱形PLGA植入劑，但僅限于體外研究，且注射時(shí)需要使用特殊針頭，而其體內(nèi)釋藥特征、生物相容性及藥效學(xué)研究未見(jiàn)報(bào)道。為了提高患者的順應(yīng)性，本文將2-ME制備成高效緩釋低毒的可局部皮下注射微球植入劑和水凝膠植入劑兩

3、種劑型，分別對(duì)兩者的體內(nèi)外釋放特性，抗癌效果和生物相容性進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，探索局部給藥治療皮下腫瘤的可行性和有效性，為該藥有效的臨床應(yīng)用提供參考。目前，尚未見(jiàn)該反面的報(bào)道。
　　 采用改良的乳化-溶劑萃取法制備2-ME微球，通過(guò)單因素考察，以微球的外觀、粒徑、包封率、體外釋放行為篩選出2-ME PLGA微球的最優(yōu)處方。結(jié)果表明所制得微球外觀圓整，表面有少許孔洞，DSC分析顯示2-ME被包封在微球的內(nèi)部，微球粒徑（55.44±

4、12.21）μm,跨距0.43，包封率（68.81±3.11）％，載藥量（8.36±0.38）％，在體外可持續(xù)恒定釋放長(zhǎng)達(dá)60天。
　　 用物理混合法制備2-ME水凝膠，通過(guò)對(duì)不同濃度不同型號(hào)的水凝膠材料PLGA-PEG-PLGA三嵌段聚合物的溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變溫度測(cè)定，選擇適合體內(nèi)外研究使用的濃度為20％（W/V）的PLGA（75/25）-PEGI1000-PLGA（75/25）作為載體，考察其釋藥行為，結(jié)果顯示在體外2-ME也可

5、以持續(xù)釋放達(dá)40天；通過(guò)對(duì)兩種植入劑的體外釋放模型擬合，說(shuō)明兩者的釋放均藥物擴(kuò)散和聚合物材料溶蝕兩種機(jī)制共同作用的結(jié)果，且2-ME微球釋放效率較為恒定，而2-ME水凝膠在釋放初始階段速率較慢。聚合物材料崩塌后藥物迅速釋放。
　　 為了闡明2-ME植入劑的體內(nèi)釋放過(guò)程，在小鼠皮下注射兩種2-ME植入劑，給藥后不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)注射部位皮下殘留藥劑量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，兩種植入劑釋放可達(dá)46天以上，釋放較平穩(wěn)。將二者體內(nèi)釋放藥量與體外釋放

6、過(guò)程進(jìn)行線性擬合，結(jié)果顯示體內(nèi)外釋放均具有較好的相關(guān)性。兩種植入劑給藥后，血漿中始終檢測(cè)不到藥物，即使劑量增加6倍，組織分布結(jié)果僅顯示較少的2-ME進(jìn)入全身，同時(shí)密切觀察給藥期間的小鼠和大鼠的體重及活動(dòng)狀態(tài)，并測(cè)定血液中白細(xì)胞數(shù)目，考察2-ME植入劑對(duì)其血液的毒性；對(duì)大鼠皮下注射含藥植入劑28天后的皮膚及皮下肌肉進(jìn)行組織學(xué)檢查，考察植入劑的生物相容性。結(jié)果表明，植入劑注射后，動(dòng)物體重持續(xù)增加，精神狀態(tài)良好，無(wú)明顯的不良反應(yīng)，在局部注射部

7、位未為出現(xiàn)異常變化，小鼠血液中白細(xì)胞數(shù)目減少，但處于正常范圍之內(nèi)；組織學(xué)檢查結(jié)果也顯示植入劑注射部位未出現(xiàn)劇烈的炎癥反應(yīng)，說(shuō)明兩種植入劑材料的生物相容性良好。
　　 以MCF-7乳腺癌和PC-3前列腺癌細(xì)胞為對(duì)象，考察2-ME植入劑的體外細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用。結(jié)果顯示，2-ME微球可持續(xù)抑制這兩種細(xì)胞株的生長(zhǎng)，并呈現(xiàn)出一定的劑量和時(shí)間依賴(lài)性；以S180荷瘤小鼠為模型，考察兩種植入劑的抗腫瘤效果。結(jié)果表明，在植入劑最低劑量?jī)H為Ⅱ期臨床