灰樹(shù)花β-葡聚糖的高效提取及量化技術(shù).pdf

1、本文通過(guò)對(duì)灰樹(shù)花β-葡聚糖的提取、測(cè)定、純化和結(jié)構(gòu)的研究，建立了熒光法測(cè)定1,3-β-葡聚糖的方法，并探討了其測(cè)定影響因素；確定了灰樹(shù)花β-葡聚糖高效提取的條件；分析了一種灰樹(shù)花β-葡聚糖的結(jié)構(gòu)。 1．研究表明可得然1,3-β-葡聚糖、酵母1,3/1，6-β-葡聚糖及灰樹(shù)花中1，3-鏈葡聚糖與苯胺藍(lán)的結(jié)合具有特異性；當(dāng)以酵母1,3/1,6-β-葡聚糖為標(biāo)準(zhǔn)物時(shí)蛋白濃度在葡聚糖濃度的一半以下，蛋白對(duì)測(cè)定影響不大；當(dāng)以可得然凝膠為標(biāo)

2、準(zhǔn)物測(cè)量時(shí)，蛋白對(duì)測(cè)定影響不大，淀粉，纖維素和麥芽糊精添加會(huì)導(dǎo)致兩種測(cè)定的熒光強(qiáng)度下降。 2．食用菌1,3-β-葡聚糖熒光法測(cè)定與鱟試劑法測(cè)定比較，結(jié)果表明熒光法簡(jiǎn)單可行。 3．通過(guò)響應(yīng)面優(yōu)化，得到灰樹(shù)花多糖提取最佳條件為：提取功率137.6W；超聲時(shí)間為16.9min；酶解溫度40℃，時(shí)間45min，pH6.0，加酶量1.5％；95℃提取兩次，在此條件下，10g灰樹(shù)花多糖提取得理論值達(dá)到12.75％；灰樹(shù)花β-葡聚糖提

3、取最佳條件為：提取頻率為148.3W；時(shí)間15.6min；溫度為95℃，在此條件下，10g灰樹(shù)花多糖提取得理論值達(dá)到3.60％。 4．對(duì)熱水提取粗β-葡聚糖進(jìn)行離子交換層析、凝膠柱層析，純化得到一種均一多糖GFWD，通過(guò)對(duì)其進(jìn)行單糖組分分析，紅外光譜分析及核磁共振分析，確定此多糖是一種1,3-β-葡聚糖。 本研究創(chuàng)新點(diǎn)在于： 1．建立了熒光法測(cè)定1,3-β-葡聚糖的方法，并研究了其影響因素。 2．以響應(yīng)面