13-17羅伯遜易位豬成纖維細胞系的建立及鑒定.pdf

1、為了加強對13/17羅伯遜易位豬這一種質資源的保護和進一步研究，本文以初生13/17羅伯遜易位雜合子豬、純合子豬及正常核型家豬耳部皮膚組織為材料，應用組織塊分離培養(yǎng)法構建了3種核型家豬的成纖維細胞系，冷凍保存細胞60支。試驗對所分離的成纖維細胞進行了形態(tài)觀察、生長動力學、染色體核型分析、綠色熒光蛋白報告質粒轉染以及微生物污染檢測等方面的生物學特性研究。
　　結果表明：倒置相差顯微鏡下3種核型家豬細胞形態(tài)呈梭形且長勢良好，為標準成纖

2、維細胞形態(tài)。凍存細胞復蘇之后活力分別為94.0％(雜合子豬)、93.3%(純合子豬)、92.8%(正常核型家豬)，說明間歇降溫凍存法效果良好。免疫組化結果表明細胞內波形蛋白呈現(xiàn)陽性表達。細胞生長曲線呈“S”型，細胞經(jīng)歷了生長緩慢期，生長對數(shù)期以及生長平臺期三個階段。細胞核型分析顯示雜合子豬細胞染色體2n=37所占比例為92.5%，純合子豬細胞染色體2n=36所占比例為93.8%，正常核型家豬細胞染色體2n=38所占比例為96.3%。質粒