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文檔簡介
1、目的:
本實驗以SD大鼠為研究對象建立非致命性創(chuàng)傷失血性休克模型,觀察各組大鼠肺組織病理變化、支氣管肺泡灌洗液中蛋白質(zhì)含量、受體交互作用蛋白1(RIP1)及RIP3含量、程序性壞死細胞比例,并觀察Nec-1對以上指標的影響,以觀察Nec-1對創(chuàng)傷失血性休克所致肺損傷是否有保護作用,并探討其可能機制,為MODS發(fā)生發(fā)展機制的完善提供理論依據(jù)。
方法:
隨機分配96只SD雄性大鼠,創(chuàng)傷組、假創(chuàng)傷組、干預組、溶媒
2、對照組各3個時間點(復蘇開始后2h、6h、12h)均為8只。創(chuàng)傷組大鼠采用非致命性的創(chuàng)傷/失血性休克模型,即腹部切口加失血后復蘇,假創(chuàng)傷組大鼠同樣采用此模型但只給予血管插管但不進行放血與復蘇,干預組大鼠于復蘇前5min尾靜脈注射Nec-11mg/kg,溶媒對照組大鼠于復蘇前5min尾靜脈注射同體積Nec-1溶媒二甲基亞砜(DMSO)。分別于復蘇開始后2、6、12h取大鼠肺組織進行HE染色病理檢查并評分、支氣管肺泡灌洗液蛋白質(zhì)含量檢測、應
3、用Western blot法檢測程序性壞死的特異性蛋白受體交互作用蛋白1(RIP1)及RIP3、流式細胞術(shù)檢測程序性壞死細胞比例。
結(jié)果:
1.假創(chuàng)傷組大鼠各時間點肺組織HE染色病理切片顯微鏡檢查無明顯變化,組織病理學評分無差異(p>0.05);創(chuàng)傷組大鼠各時間點肺組織鏡檢均較假創(chuàng)傷組有明顯變化,并有在明顯評分上有明顯差異(p均<0.01),且在復蘇后12h內(nèi)隨時間延長而損傷加重(p均<0.05),各時間點溶媒對照組
4、病理變化與創(chuàng)傷組大鼠無明顯差別(p>0.05);干預組大鼠各時間點肺組織病理變化較假創(chuàng)傷組仍有明顯變化,但較創(chuàng)傷組對應時間點病理表現(xiàn)明顯較輕(p<0.05),病理改變?nèi)噪S時間延長而明顯。
2.假創(chuàng)傷組大鼠BALF中蛋白質(zhì)含量在各時間點無明顯差異(p>0.05);創(chuàng)傷組大鼠各時間點BALF中蛋白質(zhì)含量均較假創(chuàng)傷組明顯增高(p均<0.01),且隨時間延長逐漸增高(p<0.01);各時間點溶媒對照組大鼠與創(chuàng)傷組大鼠均無明顯差異(p>
5、0.05);干預組大鼠6h內(nèi)BALF中蛋白質(zhì)含量較創(chuàng)傷組有無明顯減少(p>0.05),12h時較創(chuàng)傷組減少(p<0.05);但干預組各時間點BALF中蛋白質(zhì)含量仍明顯高于假創(chuàng)傷組(p均<0.05)。
3.創(chuàng)傷組大鼠各時間點肺RIP1和RIP3表達量較假創(chuàng)傷組均明顯增高(p均<0.01),且隨時間延長而增高(p<0.01);假創(chuàng)傷組各時間點無明顯變化(p>0.05);各時間點溶媒對照組大鼠肺RIP1和RIP3表達量與創(chuàng)傷組大鼠均
6、無明顯差異(p>0.05);干預組大鼠肺組織RIP1和RIP3表達量在6h至12h均明顯低于創(chuàng)傷組。
4.創(chuàng)傷組大鼠肺組織程序性壞死細胞比例隨時間延長而增高(p<0.01),且各時間點較假創(chuàng)傷組均有明顯升高(p均<0.01);溶媒對照組大鼠各時間點與創(chuàng)傷組大鼠無明顯差異(p均>0.05);干預組大鼠肺組織程序性壞死細胞比例在各時間點均明顯低于創(chuàng)傷組大鼠(p均<0.01),開始復蘇后2h時與假創(chuàng)傷組大鼠無明顯變化(p>0.05)
7、,但在6h及12h時間點仍高于假創(chuàng)傷組(p均<0.05)。
結(jié)論:
1.創(chuàng)傷失血性休克能導致大鼠肺損傷:毛細血管通透性增高、充血、出血、微血栓形成,肺泡及肺間質(zhì)內(nèi)富含蛋白質(zhì)液體滲出及大量炎癥細胞浸潤,并且在12h內(nèi)隨時間延長有逐漸加重趨勢。而Nec-1能夠部分抑制這種現(xiàn)象的發(fā)生。
2.大鼠創(chuàng)傷失血性休克所致肺損傷中存在細胞程序性壞死現(xiàn)象,且在復蘇后12h內(nèi)隨時間延長而增多。Nec-1能夠部分抑制創(chuàng)傷失血性休
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