BML111對(duì)失血性休克大鼠肺損傷的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、目的：探討脂氧素受體激動(dòng)劑(lipoxinreceptoragonist)BML111對(duì)失血性休克(hemorrhagicshock)大鼠急性肺損傷(acutelunginjury)的影響及其作用機(jī)制
　　方法：制作失血性休克大鼠模型,根據(jù)是否放血及給藥的不同將大鼠分為4組,分別為空白對(duì)照組,失血性休克組,BML111組及BML111+BOC2組,每組8只。將大鼠用2％戊巴比妥鈉麻醉后進(jìn)行左側(cè)頸動(dòng)脈插關(guān)機(jī)右側(cè)頸靜脈插管,左側(cè)頸動(dòng)脈

2、連接壓力轉(zhuǎn)換器儀器記錄平均動(dòng)脈壓(meanarterialpressure,MAP)變化,空白組大鼠不做放血及給藥處理,其余組大鼠按實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行放血,給藥,復(fù)蘇處理后處死取肺組織于-80度冰箱中保存,途中檢測儀記錄大鼠血壓變化。HE切片染色檢查肺組織損傷情況;使用酶聯(lián)免疫法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)檢測大鼠肺組織產(chǎn)生腫瘤壞死因子-α(tumornecrosisfactor-alpha,

3、TNF-α)的濃度;使用免疫蛋白印跡法(western-blotassay,WB)檢測大鼠肺組織細(xì)胞中血紅素加氧酶-1(hemeoxygenase,HO-1)蛋白的表達(dá)量變化及轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2(nuclearfactorerythroid-2relatedfactor2,Nrf2)蛋白的核轉(zhuǎn)錄情況;使用電泳遷移率分析法(electrophoreticmobilityshiftassays,EMSA)檢測轉(zhuǎn)錄因子Nrf2的DN

4、A結(jié)合活性變化情況。
　　結(jié)果：(1)在正常生理狀態(tài)下,大鼠MAP在125mmHg左右波動(dòng),在失血性休克期間大鼠MAP接近40mmHg,注射BML111及BOC2對(duì)大鼠的MAP變化沒有顯著影響。(2)顯微鏡觀察空白對(duì)照組肺組織切片沒有明顯炎癥變化,失血性休克組可見肺組織中中性粒細(xì)胞浸潤,肺泡透明薄形成,肺泡壁增厚等炎癥表現(xiàn),BML111注射減輕了大鼠肺組織的炎癥損傷但注射BOC2后,肺組織切片炎癥表現(xiàn)類似于失血性休克組。(3)相較

5、于空白對(duì)照組,失血性休克組TNF-a含量顯著增加(P<0.05);相較于失血性休克組,BML111組肺組織TNF-a含量顯著下降(P<0.05);相較于BML111組,BML111+BOC2組肺組織TNF-a含量顯著上升(P<0.05)。(4)相對(duì)于空白對(duì)照組,失血性休克可使肺組織細(xì)胞表達(dá)HO-1蛋白含量增加(P<0.05),與失血性休克組相比,BML111可使大鼠肺組織細(xì)胞產(chǎn)生HO-1蛋白含量下降(P<0.05),而BOC2注射后,大

6、鼠肺組織細(xì)胞產(chǎn)生HO-1情況與失血性休克組相近。(5)與空白對(duì)照組相比,失血性休克大鼠肺組織細(xì)胞核內(nèi)的Nrf2蛋白含量顯著增加(P<0.05),而胞漿內(nèi)的Nrf2蛋白含量顯著降低(P<0.05),而相對(duì)于失血性休克組,BML111可使胞漿內(nèi)的Nrf2蛋白表達(dá)升高(P<0.05),使胞核內(nèi)的Nrf2蛋白含量降低(P<0.05),使用BOC2后,胞漿及胞核內(nèi)的Nrf2蛋白表達(dá)情況與失血性休克組相近。(6)與空白對(duì)照組相比,失血性休克組的Nr