氨基甾體類衍生物對人K562和MEg-01慢粒白血病細胞的作用.pdf

1、目的:
　　觀察氨基甾體類衍生物對人慢性粒細胞白血病K562細胞系和MEG-01細胞系的抑制增殖和誘導分化作用，并進一步探討其作用機制。
　　方法:
　　采用液體培養(yǎng)實驗和CCK-8試劑盒檢測來觀察氨基甾體類衍生物對K562細胞及MEG-01細胞的抑制增殖能力;采用Wright染色及細胞表面CD71、CD41表面標記物的檢測來觀察氨基甾體類衍生物對K562及MEG-01細胞系的誘導分化作用;采用real-time RT

2、-PCR實驗分別檢測氨基甾體類衍生物對MEG-01細胞內鈣離子通道TRPC1基因mRNA表達的變化，以及對MEG-01細胞重組蛋白酪氨酸磷酸酯酶非受體1型PTPN1基因mRNA表達的變化。
　　結果:
　　細胞計數(shù)檢測結果顯示，氨基甾體類衍生物能有效地抑制K562細胞及MEG-01細胞的增殖，并呈濃度依賴性;CCK-8試劑盒檢測結果顯示，不同的氨基甾體類衍生物都能抑制MEG-01細胞的增殖，抑制作用不完全相同。終濃度為10-

3、6 mol/L的氨基甾體類衍生物作用于K562細胞及MEG-01細胞第3d后Wright染色，鏡下觀察發(fā)現(xiàn)K562細胞體積變大，核染色質濃集變粗，核漿比例變少，有核切跡，細胞質增多，核周胞質出現(xiàn)淡染區(qū)，表明K562細胞發(fā)生了一定程度的分化;MEG-01細胞則表現(xiàn)為體積變大，核染色質濃集變粗，核漿比例變少，細胞核不規(guī)則，胞質增多，核周胞質出現(xiàn)淡染區(qū)，表明MEG-01細胞發(fā)生了一定程度的分化。流式細胞儀分析顯示:終濃度為10-6 mol/L

4、的氨基甾體類衍生物分別作用于K562細胞和MEG-01細胞第3d，K562細胞膜上CD71表面標記及MEG-01細胞膜上CD41表面標記表達陽性率均升高。real-time RT-PCR實驗結果顯示:終濃度為10-6 mol/L的氨基甾體類衍生物作用于MEG-01細胞第3d，提取其RNA進行逆轉錄及擴增，與對照組相比，細胞內鈣離子通道TRPC1基因mRNA表達顯著下調;MEG-01細胞重組蛋白酪氨酸磷酸酯酶非受體1型PTPN1基因mRN

5、A表達顯著上調。
　　結論:
　　1.氨基甾體類衍生物可以有效地抑制K562細胞及MEG-01細胞的增殖，抑制效果呈一定的濃度依賴性。
　　2.氨基甾體類衍生物能誘導K562細胞系向紅系分化，誘導MEG-01細胞向巨核系分化。
　　3.氨基甾體類衍生物能顯著下調MEG-01細胞內鈣離子通道TRPC1基因mRNA表達。
　　4.氨基甾體類衍生物能上調MEG-01細胞重組蛋白酪氨酸磷酸酯酶非受體1型PTPN1基