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文檔簡介
1、惡性黑色素瘤因具有高度遷移性和致死性而被人們熟知。明膠酶,即基質金屬蛋白酶2(MMP-2)和基質金屬蛋白酶9(MMP-9),在黑色素瘤遷移過程中參與基底膜降解和細胞外基質重構,與腫瘤惡性化程度密切相關。明膠酶不僅參與胞外基質與基底膜重構,在血管發(fā)生、侵潤和遷移等腫瘤發(fā)生過程中發(fā)揮了重要作用。隨著對明膠酶研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)明膠酶不僅由腫瘤細胞分泌并且可以由基質細胞分泌,不僅能與細胞外基質蛋白相互作用,而且能與包括整合素在內的多種非基質蛋
2、白相互作用。
在黑色素瘤中,整合素αvβ3(integrin)是一類重要的異二聚體跨膜糖蛋白,能夠與含有RGD片段的配體結合,通過這種結合αvβ3可以介導細胞外配體與胞內骨架蛋白和各種信號途徑間的信號傳遞。然而,整合素αvβ3與MMP-2間的識別是通過MMP-2羧基端的PEX區(qū)而非RGD區(qū),對于MMP-2是否能通過與αvβ3的這種結合而發(fā)揮一定的信號傳遞作用目前還沒有報道。
在本研究中,我們首先利用明膠酶譜法
3、對A375細胞中明膠酶的表達進行了檢測,證實在人源黑色素瘤A375細胞中MMP-2和MMP-9均有所表達。通過使用MMP廣譜抑制劑對A375細胞鋪展和遷移進行觀察發(fā)現(xiàn),MMP-2對A375細胞的影響比較顯著。通過對A375細胞鋪展過程中MMP-2和F—actin進行免疫熒光標記,發(fā)現(xiàn)MMP-2與肌動蛋白細胞骨架的變化有一定相關性。同時,免疫熒光標記觀察發(fā)現(xiàn)MMP-2和整合素αvβ3在A375細胞懸浮、鋪展和遷移三種狀態(tài)下均有共定位現(xiàn)象。
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