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
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1、中藥成份PA-1是五環(huán)三萜類化合物,具有化學(xué)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,抗腫瘤藥理活性強(qiáng),作用機(jī)制特異,相對(duì)分子質(zhì)量較小等特點(diǎn)。有大量文獻(xiàn)報(bào)道已經(jīng)證明PA-1對(duì)黑色素瘤有抑制作用,但因?yàn)槠淙芙庑院懿?,口服不吸收,做成注射劑或口服制劑存在?yán)重的溶解度問(wèn)題,這樣就限制了它的臨床應(yīng)用。脂質(zhì)體包裹技術(shù)可以解決脂溶性藥物不易溶于水的難題,可以穩(wěn)定制劑與提高療效,是抗腫瘤藥物的理想載體。
制備PA-1脂質(zhì)體,測(cè)定其含量及載藥率,理化性質(zhì)及初步穩(wěn)定性的考
2、察。初步探討PA-1脂質(zhì)體對(duì)人黑色素瘤A375的抑制作用。
采用薄膜分散法制備PA-1脂質(zhì)體,通過(guò)正交設(shè)計(jì)優(yōu)化制備工藝和處方。利用透射電鏡觀察脂質(zhì)體的形態(tài),用激光粒度儀測(cè)定脂質(zhì)體的粒徑,用過(guò)濾法測(cè)定其含藥量和載藥率。用MTT法測(cè)定PA-1脂質(zhì)體對(duì)黑色素瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。
通過(guò)單因素考察,確定溶劑種類、溶劑用量、成膜水浴溫度、水合介質(zhì)、水浴超聲溫度和緩沖鹽pH值。以載藥率為指標(biāo),以藥物與磷脂的比例,膽固醇與
3、磷脂的比例、PBS濃度、水浴超聲的時(shí)間為四個(gè)因素,得出了正交設(shè)計(jì)的最優(yōu)組合:藥物與磷脂的比例為1:30、膽固醇與磷脂的比例為1:10、PBS6.8濃度為0.05mol/L、水浴超聲的時(shí)間20min。初步考察,從外觀和過(guò)氧化值來(lái)看,PA-1脂質(zhì)體在4℃和25℃儲(chǔ)存條件下時(shí)均不穩(wěn)定。從外觀上看,4℃與25℃條件下放置時(shí),第二天均有明顯變化,粒子變粘,脂質(zhì)體凝聚成團(tuán)的現(xiàn)象。從過(guò)氧化值來(lái)看,4℃與25℃條件下放置的脂質(zhì)體所測(cè)得的過(guò)氧化值隨著天數(shù)
4、的增加先降后升,不穩(wěn)定。因此,需要加入表面活性劑來(lái)保持脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。通過(guò)對(duì)幾種表面活性劑的考察,吐溫-80對(duì)PA-1脂質(zhì)體的穩(wěn)定性可以起到比較好的效果。PA-1脂質(zhì)體在光鏡下觀察,可以見(jiàn)到脂質(zhì)體呈現(xiàn)布朗運(yùn)動(dòng)充滿視野;脂質(zhì)體PA-1脂質(zhì)體經(jīng)透射電鏡觀察,粒徑圓整,平均粒徑為幾百個(gè)納米。接下來(lái),我們進(jìn)行了脂質(zhì)體對(duì)黑色素瘤細(xì)胞作用的初步探討,結(jié)果表明,隨著給藥濃度的降低,細(xì)胞的抑瘤率也呈下降的趨勢(shì),也就是說(shuō),黑色素瘤細(xì)胞的存活率與PA-1脂
5、質(zhì)體的給藥濃度成反比,并且PA-1脂質(zhì)體對(duì)黑色素瘤細(xì)胞的作用與PA-1相當(dāng)。
本文用薄膜分散法制備的脂質(zhì)體外觀圓整,粒徑小而均勻。脂質(zhì)體在4℃保存,短期內(nèi)是可以保持比較高的穩(wěn)定性,但是無(wú)法達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的,隨著放置時(shí)間的延長(zhǎng),穩(wěn)定性逐漸呈下降的趨勢(shì),所以,冷凍干燥將是我們接下來(lái)的重點(diǎn)。從對(duì)黑色素瘤細(xì)胞株的抑瘤率來(lái)看,脂質(zhì)體對(duì)黑色素瘤細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制是有效的,說(shuō)明,將PA-1做成脂質(zhì)體后,解決脂溶性藥物難溶的問(wèn)題,為它的臨
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