顱內(nèi)海綿狀血管瘤出血相關(guān)因素分析.pdf

1、目的：通過對海綿狀血管瘤的超微結(jié)構(gòu)及免疫組化方面進(jìn)行研究，深入探索CCM反復(fù)出血的發(fā)病機(jī)制，并對其原因給予推斷，以期為臨床治療該疾病提供必要的理論依據(jù)。 方法：⑴標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋、切片，行HE染色及免疫組織化學(xué)染色。實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照免疫組織化學(xué)SABC法常規(guī)染色步驟進(jìn)行。Ang—1及CD68一抗?jié)舛葹?：200，MMP—9一抗?jié)舛葹?:160，水浴加熱25分鐘，SABC試劑盒及其他實(shí)驗(yàn)試劑均購于武漢博士德公司，每次實(shí)驗(yàn)均設(shè)陰性及陽性

2、對照。⑵取新鮮組織切成米粒大小于2.5％戊二酸中固定，0.1MPBS(磷酸緩沖液)漂洗，1％鋨酸固定，0.1MPBS(磷酸緩沖液)漂洗，酒精梯度脫水，EPON812(環(huán)氧樹脂)浸透、包埋，超薄切片70nm，醋酸鈾、檸檬酸鋁染色，JEM—1200EX鏡下觀察，拍片。⑶對照相應(yīng)的普通病理學(xué)切片，觀察免疫組化染色切片血管腔的內(nèi)皮細(xì)胞層、內(nèi)皮下層、海綿間隙基質(zhì)及血管周圍的組織學(xué)特點(diǎn)與免疫染色情況。由1位對病情不了解的病理科醫(yī)生觀察染色結(jié)果，根據(jù)

3、1996年全國免疫組化技術(shù)與診斷標(biāo)準(zhǔn)，細(xì)胞漿和(或)細(xì)胞核呈棕黃色至深棕黃色為陽性細(xì)胞，按照同一部位血管染色強(qiáng)度，所有免疫組織化學(xué)染色結(jié)果與染色結(jié)果為AAA標(biāo)本對照，染色結(jié)果被分為四級(jí)：在所有內(nèi)皮細(xì)胞中染色為陰性或陽性結(jié)果少于25％記為(-)，陽性結(jié)果位于25％～50％之間記為(+)，50％～75％之間為(++)，大于75％為(+++)。電鏡下著重觀察內(nèi)皮基底膜，內(nèi)皮細(xì)胞間隙等變化。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0軟件包，組間比較采用秩和

4、檢驗(yàn)。 結(jié)果：①光鏡下海綿狀血管瘤病灶主要由竇狀擴(kuò)張的共壁血管組成，血管腔大小不一，病灶內(nèi)含有紅細(xì)胞。CCM血管壁薄，僅有單層內(nèi)皮細(xì)胞和較薄的外膜，缺乏肌層和彈力層，不含腦實(shí)質(zhì)組織。肝海綿狀血管瘤血管壁較厚，可見纖維組織及膠原組織。②免疫組化染色Ang—1免疫陽性產(chǎn)物為棕黃色顆粒，主要分布于血管內(nèi)皮細(xì)胞的包漿，其在CCM中的表達(dá)較低，與對照組相比差異無顯著性(P>0.05)，CD68及MMP—9表達(dá)主要位于血管外膜細(xì)胞的包漿，產(chǎn)

5、物同樣為棕黃色或黃色顆粒，其在CCM中表達(dá)顯著增高，與對照組相比差異有顯著性。CD68與MMP—9的表達(dá)之間行秩和相關(guān)分析結(jié)果r=0.870兩者間呈高度正相關(guān)。③電鏡下CCM血管結(jié)構(gòu)不完整，內(nèi)皮細(xì)胞呈單層分布，核多規(guī)則，核內(nèi)異染色質(zhì)邊集，細(xì)胞間可見明顯的間隙連接，基底膜模糊顯示不清，線粒體增多，血管周邊大量電子密度高的沉積物。肝海綿狀血管瘤與CCM明顯不同的是細(xì)胞間連接緊密，基底膜清晰可見，但細(xì)胞核形態(tài)不規(guī)則。 結(jié)論：顱內(nèi)海綿狀