大腸桿菌聯(lián)合索拉菲尼治療肝癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　單純應(yīng)用E.coli、單純應(yīng)用Sorafenib、聯(lián)合應(yīng)用E.coli和Sorafenib治療移植性肝癌模型鼠的效果對(duì)比和機(jī)制研究。
　　方法:
　　1.采用隧道種植法建立SD大鼠移植性肝癌模型。第一步:復(fù)蘇Walker_256腫瘤細(xì)胞，離心濃縮后接種到Wistar幼鼠右前肢腋窩皮下;第二步:待Wistar幼鼠皮下腫瘤長(zhǎng)到2cm左右，取出腫瘤組織，立即冰浴在生理鹽水中，選取生長(zhǎng)旺盛部分，制成直徑0.1-0.

2、2cm的腫瘤組織小塊;第三步:于無菌條件下，經(jīng)手術(shù)將瘤塊接種到SD大鼠動(dòng)物肝臟左前葉;第四步:荷瘤SD大鼠移植性肝癌模型手術(shù)后10-14天，沿腹正中切開顯露腫瘤并測(cè)量大小，選取瘤塊長(zhǎng)徑或短徑在0.5-1.0cm并且無腹水的荷瘤鼠進(jìn)行大腸桿菌聯(lián)合索拉菲尼的實(shí)驗(yàn)研究。
　　2.將符合入組條件:瘤塊長(zhǎng)徑或短徑在0.5-1.0cm并且無腹水的模型SD大鼠隨機(jī)分成5個(gè)組:生理鹽水(NS)組、5Fu組、E.coli組、Sorafenib組、E

3、.coliandSorafenib組。按組別將E.coli4013菌液0.1ml和等量NS分別注射入模型動(dòng)物腫瘤內(nèi)。分組后第二天按組別給予Sorafenib灌胃、5Fu腹腔注射，共20天，期間每3天進(jìn)行體重測(cè)量。于干預(yù)20天后所有動(dòng)物進(jìn)行心臟取血后用于血常規(guī)分析和血培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，然后處死全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，取出腫瘤切開觀察內(nèi)容物，并對(duì)各組瘤塊進(jìn)行組織病理形態(tài)學(xué)HE及免疫組織化學(xué)IHC的觀察和比較。最后對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析與比較，得出結(jié)論。<

4、br>　　結(jié)果:
　　1SD大鼠Walker256移植性肝癌模型成瘤率達(dá)100％，移植性手術(shù)11天后符合入組條件:瘤塊長(zhǎng)徑或短徑在0.5-1.0cm并且無腹水的模型鼠百分率僅占32.2％。Walker256移植性肝癌模型腫瘤生長(zhǎng)迅速，腹水出現(xiàn)時(shí)間不等。
　　2從HE結(jié)果分析可知，E.coli組瘤內(nèi)注射E.coli抑制肝癌實(shí)體瘤效果達(dá)66.7％，Sorafenib組抑制肝癌實(shí)體瘤效果達(dá)80％，E.coli聯(lián)合Sorafenib

5、組抑制肝癌實(shí)體瘤效果達(dá)100％;從IHC結(jié)果分析可知，E.coli具有破壞腫瘤細(xì)胞侵襲功能起重要作用的基質(zhì)基因金屬蛋白酶9和波形蛋白的作用，并具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用;此外各組大鼠的血細(xì)菌培養(yǎng)均沒有檢出細(xì)菌。
　　結(jié)論:
　　1.采用walker256移植性肝癌模型SD大鼠是一種性質(zhì)穩(wěn)定，成瘤率高的模型。
　　2.E.coli43013能破壞實(shí)體瘤的微環(huán)境，破壞腫瘤細(xì)胞侵襲功能起重要作用的基質(zhì)基因金屬蛋白酶9和波形蛋