脂質體轉染胞嘧啶脫氨酶基因（CD-5-FC）聯(lián)合放射線治療人直腸癌的實驗研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學碩士學位論文脂質體轉染胞嘧啶脫氨酶基因（CD5FC）聯(lián)合放射線治療人直腸癌的實驗研究姓名：呂文平申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學（普通外科）指導教師：李世擁2002.5.12、4、8Gy不同劑量照射細胞，照射后1小時利用Lipofectin轉染細胞。36小時后倒置熒光顯微鏡觀察與比較熒光情況，同時計算轉染效率。(5)脂質體轉染CD基因與5一FclOOug／ml共同孵育72小時后。采用臨床常用劑量2Gy進行照射，照射72小時后流

2、式細胞儀檢測細胞凋亡率，同時設空白對照組、單純放射組(2Gy)、單純CD／5FC組3個對照組。(6)荷瘤裸鼠的制備及分組：將HR一8348細胞02ml(05107細胞／m1)接種于4—5周BALB／Cnu／nu裸鼠右側后肢外側皮下，待瘤體長至長徑達05cm后，用隨機數(shù)字法將裸鼠分為4組，每組10只。實驗組(CD／5FC放療)：Y射線局部照射患肢，第0天起2Gy／day連續(xù)照射15天：對每個腫瘤于第0、4、8、12天放療后多點注射200u

3、lLipofectin—PXJ41／CD復合體；第3天始腹腔注射5FC800mg／kg／day，連續(xù)12天。單純CD／5FC治療組：除不進行放射線照射外余同實驗組。單純放射治療組：對裸鼠進行屏蔽照射同實驗組。空白對照組：生理鹽水200u1于第0、4、8、12天瘤體多點注射。于治療后第30天拉頸法處死各組裸鼠。繪制荷瘤裸鼠的腫瘤生長曲線，計算瘤體積抑制率及瘤重抑制率結果(1)0、2、4、8Gy的轉染效率分別為2132％、6217％、68％

4、、7778％，放射各組與未放射組之間存在顯著差異(x!=1371，P001)，而且隨著放射劑量的增加轉染效率呈現(xiàn)上升趨勢：(2)流式細胞術顯示，細胞凋亡率(亞G，峰)分別為實驗組是292I％，空白對照組是O72％，2Gy照射組是622％，單純CD／5FC組是1182％。實驗組為單純放射組的470倍，為單純放射組和單純CD／5FC組之和的162倍。各組間差異有顯著性(x。11374，PO01)；(3)荷瘤鼠各組腫瘤生長曲線示：實驗組治療第