降鈣素基因相關(guān)肽對(duì)高糖孵育乳鼠心肌細(xì)胞缺氧-復(fù)氧損傷的影響.pdf

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文系在導(dǎo)師指導(dǎo)下本人獨(dú)立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明確標(biāo)注或得到許可。論文內(nèi)容未包含法律意義上已屬于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其它學(xué)位申請(qǐng)的論文或成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本文如違反上述聲明，愿意承擔(dān)以下責(zé)任和后果：1 、交回學(xué)校授予的學(xué)位證書；2 、學(xué)?？稍谙嚓P(guān)媒體上對(duì)作者本人的行為進(jìn)行通報(bào)：3

2、、本文按照學(xué)校規(guī)定的方式，對(duì)因不當(dāng)取得學(xué)位給學(xué)校造成的名譽(yù)損害，進(jìn)行公開道歉。4 、本人負(fù)責(zé)因論文成果不實(shí)產(chǎn)生的法律糾紛。論文作者簽名： 讒賊． 日期：如，多年／月時(shí)日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解山西醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)山西醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存論

3、文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表或使用學(xué)位論文或與該論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí)，署名單位仍然為山西醫(yī)科大學(xué)。( 保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：( 本聲明的版權(quán)藹，磚 軀歸山西醫(yī)科大學(xué)1日期：二新≯年廠月厶f 日日期：加，甲年 鈿／J 一日所有，未經(jīng)許可，任何單位及任何個(gè)人不得擅自使用)山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文降鈣素基因相關(guān)肽對(duì)高糖孵育乳鼠心肌細(xì)胞缺氧／復(fù)氧損傷的影響中文摘要目的探討降鈣素基因相關(guān)肽( C

4、 a l c i t o n i n G e n e R e l a t e d P e p t i d e ，C G R P ) 預(yù)先給藥對(duì)正常大鼠心肌細(xì)胞以及高糖孵育大鼠心肌細(xì)胞缺氧／復(fù)氧( A n o x i a - r e o x y g e n a t i o n ，A ／R ) 損傷的影響。方法( 1 ) 乳鼠心肌細(xì)胞體外培養(yǎng)與鑒定。選用健康1 ～3 天齡的S D 大鼠，雌雄不拘，用于心肌細(xì)胞體外培養(yǎng)模型的建立。采用免疫細(xì)胞

5、化學(xué)S A B C 法對(duì)所培養(yǎng)的心肌細(xì)胞進(jìn)行鑒定。( 2 ) 心肌細(xì)胞缺氧／復(fù)氧模型的建立。將培養(yǎng)7 2 h 的心肌細(xì)胞置于密閉缺氧盒中培養(yǎng)3 h 模擬缺氧，更換培養(yǎng)液后在正常培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 h 模擬復(fù)氧，缺氧／復(fù)氧結(jié)束后檢測心肌細(xì)胞凋亡率。( 3 ) 采用免疫熒光技術(shù)對(duì)心肌細(xì)胞中C G R P 受體的分布進(jìn)行定位。( 4 ) C G R P 對(duì)大鼠心肌細(xì)胞缺氧／復(fù)氧損傷的影響。采用隨機(jī)數(shù)字表法，取1 2孔心肌細(xì)胞隨機(jī)分為4 組( n

6、= 3 ) ：對(duì)照組，不加任何藥物干預(yù)，并且不進(jìn)入缺氧／復(fù)氧程序；缺氧／復(fù)氧組，不加任何藥物干預(yù)，只進(jìn)行缺氧／復(fù)氧程序；缺氧／復(fù)氧+ C G R P 組，缺氧前1 小時(shí)給予C G R P ( 1 0 —8 m o l ／L ) ，之后進(jìn)入缺氧／復(fù)氧程序；缺氧／復(fù)氧+ C G R P + C G R P 8 - 3 7 組，缺氧前1 小時(shí)給予C G R P ( 1 0 ～m o l ／L ) + c G R P l受體拮抗劑C G R P

7、 8 ．3 7 ( 1 0 。7 m o l ／L ) ，之后進(jìn)入缺氧／復(fù)氧程序。缺氧／復(fù)氧損傷后測定心肌細(xì)胞凋亡率、乳酸脫氫酶( L D H ) 釋放量以及培養(yǎng)液中半胱氨酸天冬蛋白酶3 ( c a s p a s e ．3 ) 活性。( 5 ) C G R P 對(duì)高糖孵育大鼠心肌細(xì)胞缺氧／復(fù)氧損傷的影響。用低糖和高糖D M E M 培養(yǎng)基孵育原代培養(yǎng)的S D 大鼠心肌細(xì)胞建立高糖損傷模型，培養(yǎng)7 2 h后進(jìn)入缺氧／復(fù)氧程序，于缺氧前隨