降鈣素基因相關(guān)肽通過(guò)NOS-NO通路抑制缺氧誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞凋亡.pdf

1、背景：降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide，CGRP)是降鈣素肽家族的一種神經(jīng)肽，對(duì)缺血缺氧性心血管系統(tǒng)起保護(hù)作用，然而其機(jī)制尚未明確。
　　目的：研究CGRP是否通過(guò)調(diào)節(jié)一氧化氮（nitric oxide，NO）抑制缺氧心肌細(xì)胞的凋亡。
　　方法：選用大鼠 H9c2心肌細(xì)胞建立缺血缺氧損傷模型，給予CGRP和/或一氧化氮合酶（ nitric oxide synthase， NOS

2、)抑制劑（Nω-Nitro-L-arginine methylester hydrochloride，L-NAME）預(yù)處理細(xì)胞，CCK-8法測(cè)定細(xì)胞存活率，Western-Blot法測(cè)定NOS和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)水平， NO試劑盒測(cè)定 NO釋放量，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ enzyme-linked immunoabsorbent assay， ELISA)腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白介素-

3、6(interleukin-6，IL-6)活性。
　　結(jié)果：缺氧使心肌細(xì)胞存活率降低，誘導(dǎo)性一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）表達(dá)明顯增加，內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）和磷酸化內(nèi)皮型一氧化氮合酶（phosphorylation endothelial nitric oxide synthase，p-eNOS）

4、表達(dá)降低，NO釋放減少，p53、caspase-3和細(xì)胞色素C(cytochrome C)表達(dá)升高；CGRP預(yù)處理后，心肌細(xì)胞存活率升高，iNOS表達(dá)減少， eNOS和p-eNOS表達(dá)增加，NO的釋放進(jìn)一步降低，凋亡相關(guān)蛋白活性下降；L-NAME處理后，iNOS和p53表達(dá)降低；L-NAME與CGRP共處理后，與CGRP單獨(dú)處理相比較，NOS表達(dá)降低，p53、caspase-3和cyto C表達(dá)升高；同時(shí)CGRP可以顯著降低缺氧誘導(dǎo)的T