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1、湖南大學(xué)博士學(xué)位論文淀粉納米顆粒的制備及其作為抗癌藥物基因載體的研究姓名:肖蘇堯申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):分析化學(xué)指導(dǎo)教師:劉選明20070424淀粉納米顆粒的制備及其作為抗癌藥物/基因載體的研究(3)無(wú)細(xì)胞毒性:空白顆粒與體外細(xì)胞共培養(yǎng),結(jié)果表明該納米顆粒無(wú)細(xì)胞毒性?;蜉d體的體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染:PLLStNPs結(jié)合綠色熒光蛋白基因pEGFP,能有效導(dǎo)入體外培養(yǎng)的MCF一7細(xì)胞,并在細(xì)胞內(nèi)獲得高效表達(dá),轉(zhuǎn)染率達(dá)28%左右。通過(guò)多次改變N/P的
2、比值進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,以N/P=15的PLL—StNP/pEGFP復(fù)合物轉(zhuǎn)染乳腺癌MCF一7傳代細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效果最好。上述結(jié)果表明:PLL—StNPs可以作為一種有效的基因載體。3葉酸修飾淀粉納米藥物載體的研制及其肝癌靶向特性分析葉酸一淀粉納米藥物載體的合成及表征:葉酸活化后先與PEG一(NH。)。結(jié)合,得到FA—PEGNH。然后將FA~PEG—NH:修飾到淀粉納米顆粒(StNP)上,從而成功制備獲得葉酸一淀粉納米顆粒(FA—P
3、EGStNP),經(jīng)掃描電子顯微鏡檢測(cè)其平均直徑約為130nm。FA—PEGStNP的特性:(1)FAPEG—StNP的親水性。將FA—PEGStNP和FAStNP分別注射到小鼠的腹腔誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞,結(jié)果顯示FA—PEGStNP誘導(dǎo)出的巨噬細(xì)胞數(shù)目只有FAStNP的一半,結(jié)果表明FA—PEGStNP具有更強(qiáng)的親水性,降低了機(jī)體對(duì)它的清除能力(2)FAPEGStNP結(jié)合藥物的緩釋作用。與抗癌藥物多柔比星(OOX)結(jié)合,飽和量為28pg/mg,
4、藥物具有明顯的緩釋現(xiàn)象。(3)FAPEG—StNP肝癌靶向特性:修飾了熒光物質(zhì)FITC的FA—PEG—StNP與肝癌細(xì)胞和正常肝細(xì)胞共培養(yǎng),在前者細(xì)胞中檢測(cè)到的熒光值是后者的3倍;修飾了熒光物質(zhì)FITC的FAPEGStNP和StNP分別與肝癌細(xì)胞共培養(yǎng),前者的熒光值是后者的4倍,表明修飾葉酸的顆粒具有明顯的肝癌細(xì)胞靶向的功能。載藥顆粒作用于肝癌細(xì)胞:裝載抗癌藥物阿酶素(DOX)的FAPEGStNP與裝載DOX的StNP分別在無(wú)葉酸培養(yǎng)基
5、中與肝癌細(xì)胞BEL7404共培育,結(jié)果顯示前者的細(xì)胞致死率達(dá)是后者的2倍,而藥物對(duì)細(xì)胞的半致死濃度是后者的30%左右,說(shuō)明修飾在顆粒上的FA能顯著提高顆粒對(duì)肝癌細(xì)胞的靶向作用,保持藥物的有效濃度,提高了治療效果。所制各的葉酸一淀粉納米顆粒具有藥物緩釋、靶向識(shí)別、降低毒副作用的特點(diǎn),可以作為腫瘤靶向性藥物載體。4活性硒一淀粉載藥復(fù)合納米顆粒的合成及協(xié)同作用研究活性硒一淀粉復(fù)合載藥納米顆粒的合成:先將Na2Se03還原成具有抗氧化活性的紅色
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