早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷動物模型的建立及早期干預的療效研究.pdf

1、目的：
　　 建立4日齡SD大鼠腦白質(zhì)損傷(white matter damage，WMD)動物模型，早期分別給予重組人紅細胞生成素(recombinant human erythropoietin，rHuEPO)、單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂(monosialotetrahexosylganglioside，GM1)或神經(jīng)生長因子(nerve growth factor，NGF)治療，比較干預后大鼠的病理形態(tài)學和神經(jīng)行為功能改變情

2、況，探討rHuEPO、GM1和NGF對缺血缺氧性WMD新生大鼠的神經(jīng)保護作用，為臨床早期干預早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷提供依據(jù)。
　　 方法：
　　 4日齡SD大鼠290只，隨機分為5組：假手術(shù)組、生理鹽水(saline，NS)組、EPO組、GM1組和NGF組。假手術(shù)組僅切開頸部皮膚，分離雙側(cè)頸總動脈，再縫合頸部傷口，其余四組結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈，再分別予以等體積的NS 0.01 ml/g、EPO5IU/g、GM1 0.02 mg/g

3、、NGF 2 IU/g腹腔內(nèi)注射，GM1和NGF間隔24h重復給藥，共給藥5次。各組動物分別于術(shù)后（假手術(shù)組于對應(yīng)時間）24h、48h、72h、7d、26d稱量體重，再斷頭處死。常規(guī)H-E染色觀察腦白質(zhì)損害情況，免疫組織化學染色觀察各時間點髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein，MBP)、β淀粉樣前體蛋白(β-amyloid precursor protein，β-APP)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrilla

4、ry acidic protein，GFAP)抗原的表達。術(shù)后26d(生后30d)采用懸吊、斜坡和曠場試驗進行神經(jīng)行為學檢測。
　　 結(jié)果：
　　 1．四組WMD大鼠體重明顯增長不良，各時間點NS組、EPO組、GM1組和NGF組大鼠的體重均與假手術(shù)組有顯著性差異(P<0.05)；而術(shù)后7d、26d EPO組大鼠和術(shù)后26d NGF組體重高于NS組，差異有顯著性意義(P<0.05)；各時間點GM1組大鼠體重均與NS組無顯著

5、性差異(P>0.05)。
　　 2．缺血缺氧后大鼠出現(xiàn)腦室周圍白質(zhì)損傷，光鏡下表現(xiàn)為腦室周圍白質(zhì)細胞腫脹、壞死和凋亡、組織疏松、側(cè)腦室進行性擴大。與NS組比較，EPO組、GM1組和NGF組大鼠光鏡下病理變化無明顯差異，但術(shù)后72h片狀壞死的范圍較小，術(shù)后7d、26d側(cè)腦室擴大的程度較輕。
　　 3．缺氧缺血后大鼠腦組織免疫組化染色MBP陽性細胞百分率降低，APP、GFAP陽性細胞百分率增高。給予rHuEPO、GM1、NG

6、F治療后，術(shù)后72h、7d MBP陽性細胞百分率較NS組增高，術(shù)后72h、7d、26d APP陽性細胞百分率較NS組降低，術(shù)后48h、72h、7d、26d GFAP陽性細胞百分率較NS組降低，差異有顯著性意義(P<0.05)。
　　 4．30日齡時，NS組、EPO組、GM1組和NGF組大鼠反應(yīng)遲鈍、自主活動減少，靈活性、穩(wěn)定性降低。NS組大鼠懸吊、斜坡和曠場試驗的結(jié)果均差于假手術(shù)組，差異有顯著性意義(P<0.05)；EPO組、G