胱氨酸-谷氨酸轉(zhuǎn)運體在兔機械通氣肺損傷發(fā)生中的作用.pdf

1、目的:本實驗以新西蘭大白兔為研究對象復(fù)制機械通氣肺損傷(VILI)模型，從整體水平上探討胱氨酸/谷氨酸轉(zhuǎn)運體(Xc-)系統(tǒng)在VILI發(fā)生發(fā)展中的病理生理意義，并且觀察Xc-抑制劑L-同型半胱氨酸(L-HCA)對VILI的作用，為VILI的發(fā)病機制的進一步研究和臨床上VILI的防治提供新的思路。
　　方法:
　　1.將新西蘭大白兔隨機分為小潮氣量對照組(LV)、大潮氣量損傷組(HV)、L-HCA處理組(HV+L-HCA)和L-

2、HCA對照組(LV+L-HCA)四組。
　　2.小潮氣量通氣策略:VT=8 mL/kg，E∶I=2∶1，f=35次/分，F(xiàn)iO2=0.21，PEEP=3 cmH2O，t=4 h;大潮氣量通氣策略:VT=35 mL/kg，E∶I=2∶1，f=8次/分，F(xiàn)iO2=0.21，PEEP=0，t=4h。造模4h后股動脈放血處死實驗動物收取標本。
　　3.測定指標:(1)肺外觀評定和肺組織濕重/干重比值(W/D)測定;(2)常規(guī)HE染色

3、觀察肺組織病理變化;(3)比色法測定肺組織勻漿中丙二醛(MDA)含量、髓過氧化物酶(MPO)活性和總谷胱甘肽(T-GSH)含量;(4)Real-time PCR測定肺組織腫瘤壞死因子-alpha(TNF-a)、白細胞介素-1 beta(IL-1β)mRNA的表達水平;(5) ELISA測定肺組織勻漿中TNF-α、IL-1β的含量;(6)Real-time PCR測定肺組織xCT、4F2 heavy chain(4F2hc) mRNA的表

4、達水平。
　　結(jié)果:
　　1.L-HCA對兔肺組織外觀變化和形態(tài)學(xué)改變的影響:HV組肺體積明顯增大，水腫嚴重，肺顏色呈棕褐色或暗紅色，肺葉可明顯出血點或出血斑;L-HCA處理組后，上述癥狀不同程度得到改善。光鏡下可見HV組病理切片顯示明顯的炎癥細胞浸潤、充血水腫導(dǎo)致的肺間質(zhì)或肺泡隔增厚及肺泡結(jié)構(gòu)的破壞，L-HCA處理組上述肺病理改變得到不同程度減輕。
　　2.L-HCA對兔肺組織濕重/干重比值(W/D)變化的影響:與L

5、V組比較，HV組肺組織濕重/干重比值明顯增高; L-HCA處理后可降低HV引起的肺濕重/干重比值的增加。
　　3.L-HCA對兔肺組織勻漿MDA含量變化的影響:與LV組比較，HV組肺組織勻漿中MDA的含量顯著增加;L-HCA處理后能明顯抑制肺組織勻漿中MDA的含量的增加。
　　4.L-HCA對兔肺組織勻漿MPO活性變化的影響:與LV組比較，HV組肺組織勻漿中MPO活性顯著增加;L-HCA處理后能明顯抑制肺組織勻漿中MPO活性

6、的增加。
　　5.L-HCA對兔肺組織勻漿T-GSH含量變化的影響:與LV組比較，HIV組肺組織勻漿中T-GSH的含量顯著增加;L-HCA處理后能明顯抑制肺組織勻漿中T-GSH的含量的增加。
　　6.L-HCA對兔肺組織TNF-α、IL-1β、IL-8 mRNA表達變化的影響:與LV組比較，HV組肺組織TNF-α(P＜0.05)、IL-1β(P＜0.01)、IL-8(P＜0.05) mRNA表達均明顯增加;與HV組比較，L-

7、HCA處理后IL-1βmRNA表達顯著下降; TNF-α、IL-8 mRNA表達均無明顯下降。
　　7.L-HCA對兔肺組織勻漿TNF-α、IL-1β含量變化的影響:與LV組比較，HV組肺組織勻漿TNF-α(P＜0.05)、IL-1β(P＜0.05)含量均明顯增加;與HV組比較，L-HCA處理后TNF-α含量無明顯下降，而IL-1β含量顯著降低。
　　8.L-HCA對兔肺組織xCT mRNA表達變化的影響:與LV組比較，HV

8、組肺組織中xCT mRNA的表達水平顯著升高(P＜0.01);L-HCA處理后肺組織xCT mRNA的表達水平明顯下降。
　　9.L-HCA對兔肺組織4F2hc mRNA表達變化的影響:與LV組比較，HV組肺組織4F2hcmRNA的表達水平有升高的趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義; L-HCA處理后肺組織4F2hcmRNA的表達水平無明顯下降。
　　結(jié)論:
　　1.首次顯示正常兔肺組織存在Xc-陽性表達，其中4F2hc存在更高