野鳥(niǎo)中NDV、ALV、IBV和IBDV四重RT-PCR檢測(cè).pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、新城疫病毒(NDV)、禽白血病病毒（ALV）、禽傳染性支氣管炎病病毒(IBV)、禽傳染性法氏囊病病毒(IBDV)是最常見(jiàn)的四種禽病的致病因子，給家禽養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。為初步了解野生鳥(niǎo)類(lèi)中NDV、ALV、IBV、IBDV的病毒感染狀況，本實(shí)驗(yàn)基于四種病毒基因組的特異性高度保守核酸序列，設(shè)計(jì)了四對(duì)通用引物，克隆得到目的片段重組質(zhì)粒，通過(guò)正交法優(yōu)化四重RT-PCR反應(yīng)體系，建立了可同時(shí)檢測(cè)NDV、ALV、IBV、IBDV的四重RT-

2、PCR檢測(cè)方法，并進(jìn)行了特異性和靈敏度檢驗(yàn)，最后對(duì)67只野生鳥(niǎo)類(lèi)的四種臟器進(jìn)行了實(shí)際樣本檢測(cè)。結(jié)果表明，該方法可以擴(kuò)增得到大小不一的四種目的片段158 bp(NDV)、131 bp(IBV)、109 bp（ALV）、94 bp(IBDV);特異性實(shí)驗(yàn)表明該方法可以有效檢出四種病毒任意混合樣品，但檢測(cè)不出馬利克病毒、禽痘病毒、禽減蛋綜合征病毒和禽流感病毒;靈敏度實(shí)驗(yàn)表明該方法可檢出102 copy的pMD-18T-NDV，102 copy

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