泰安地區(qū)肉雞生產(chǎn)鏈中沙門氏菌耐藥性和分子分型研究.pdf

1、目的：通過對泰安地區(qū)肉雞生產(chǎn)鏈各環(huán)節(jié)中的沙門氏菌進行調(diào)查，了解生產(chǎn)鏈中各環(huán)節(jié)沙門氏菌的污染水平、血清型分布，為肉雞生產(chǎn)過程中沙門氏菌的防控提供依據(jù)；了解生產(chǎn)鏈中沙門氏菌的耐藥現(xiàn)狀及各個生產(chǎn)環(huán)節(jié)間耐藥差異，為臨床用藥提供指導(dǎo)；結(jié)合ERIC-PCR和MLST分型方法對生產(chǎn)鏈中的沙門氏菌進行分子研究，比較菌株間的親緣關(guān)系和耐藥性與基因型的關(guān)系，為菌株的流行病學(xué)研究提供技術(shù)基礎(chǔ)。
　　方法：2014年在泰安采集肉雞生產(chǎn)鏈中各環(huán)節(jié)（包括種雞

2、場、孵化場、商品肉雞場、屠宰場、市場5個采樣點16個采樣環(huán)節(jié)）樣品。利用常規(guī)檢測方法和PCR對菌株進行分離鑒定，玻片凝集試驗、xMAP液相芯片法和多重PCR方法鑒定血清型；微量肉湯稀釋法（MIC法）測定菌株對8類13種抗菌藥的敏感程度；通過初篩、確證試驗進行產(chǎn)ESBLs（Extended Spectrumβ-Lactamases，超廣譜β-內(nèi)酰胺酶）菌株的表型檢測，PCR方法鑒定基因型。通過ERIC-PCR和MLST方法對耐藥相關(guān)的42

3、株菌進行分型。
　　結(jié)果：2086份樣品共分離出332株（15.92％）。孵化場弱雛分離率最高（51.00%），種雞場分離率（3.33%）最低，死胚內(nèi)部50%、死胚表面50%、12日齡肉雞14.6%、15日齡肉雞20%、屠宰胴體16.00%、噴淋水32%、預(yù)冷液36.67%、分割雞肉13%，器具14.5%、血水24%、市售成品46.67%。共分離出2種血清型，分別為腸炎沙門氏菌（98.80%）、Ⅱ或Ⅵ沙門氏菌（1.2%），除來自1

4、2日齡肉雞的菌株包含兩種血清型外其他生產(chǎn)環(huán)節(jié)的菌株血清型均為腸炎沙門氏菌。
　　332株菌對AM耐藥程度最高（78.31%），其次為SPT（70.18%），對OFL、ENR最為敏感（4.22%），其次為FFC（4.82%）和GM（6.93%）；DOX、CLE、SXT、CEF、SF、A/C、TE耐藥率分別為40.96%、33.13%、25.00%、21.99%、18.67%、16.57%、12.35。83.73%（278/332）的

5、菌株表現(xiàn)為多重耐藥（≥2），產(chǎn)生了52種耐藥譜型。不同生產(chǎn)環(huán)節(jié)對同一種藥物敏感程度存在差異。
　　332株沙門氏菌中16株（4.82%）產(chǎn)ESBLs，基因型為TEM型（16/16）、CTX-M型（5/16）。產(chǎn)ESBLs和非產(chǎn)ESBLs菌株僅對CLE、SPT的耐藥性差異不顯著（P>0.05）。產(chǎn)ESBLs菌株多重耐藥主要集中在7耐、10耐、11耐，非產(chǎn)ESBLs菌株則以2耐、3耐、4耐為主。
　　42株菌分為3（Ⅰ~Ⅲ）個聚

6、類簇5個基因型別，Ⅰ類（28株）均為腸炎沙門氏菌，包含5個采樣點。Ⅱ類（4株）為Ⅱ或Ⅵ型沙門氏菌，均來自肉雞場（12d），Ⅲ類（10株）均為腸炎沙門氏菌，包含除市場外其他4個采樣點。基因型與耐藥性之間沒有明顯的相關(guān)性。MLST分型分為ST11（90.48%）和ST17（9.52%），ST11型的菌株均為腸炎沙門氏菌，ST17的菌株為僅有的4株Ⅱ或Ⅵ型沙門氏菌。
　　結(jié)論：泰安地區(qū)肉雞生產(chǎn)鏈中沙門氏菌污染狀況較為嚴(yán)重，孵化場和市場環(huán)