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文檔簡介
1、先天性疾病、炎癥、感染、腫瘤以及創(chuàng)傷等可導(dǎo)致膀胱結(jié)構(gòu)和功能的缺失與損害,而傳統(tǒng)的腸道代膀胱會引起多種并發(fā)癥,如酸堿代謝紊亂、感染、結(jié)石甚至惡變等。組織工程技術(shù)的發(fā)展為膀胱重建帶來了全新的方法。目前,構(gòu)建的膀胱組織植入體內(nèi)后的快速血管化是組織工程膀胱面臨的主要問題,利用在支架材料上復(fù)合生長因子為組織工程膀胱體內(nèi)充分快速血管化提供了一種選擇。
堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor,b
2、FGF)對創(chuàng)傷愈合、組織修復(fù)、血管形成起著重要促進(jìn)作用,但將 bFGF簡單吸附到材料上再植入體內(nèi),體液的浸潤和流動(dòng)造成因子擴(kuò)散,導(dǎo)致修復(fù)效果有限。因此,我們在bFGF的N端偶聯(lián)膠原結(jié)合區(qū)(Collagen binding domain,CBD),使其具有結(jié)合膠原能力,在體內(nèi)可以定點(diǎn)、持續(xù)釋放再生信號分子,同時(shí)外源的膠原支架材料也為細(xì)胞增殖和組織再生提供了三維空間。
本課題以大動(dòng)物比格犬進(jìn)行膀胱重建實(shí)驗(yàn),研究內(nèi)容包括以下兩個(gè)部分
3、:
第一部分:比格犬膀胱損傷模型制作及組織工程膀胱的重建。
將由中科院遺傳與發(fā)育研究所提供的 CBD-bFGF和膠原支架材料,制備成CBD-bFGF/Collagen材料及 PBS/Collagen材料。13只雄性成年比格犬分為假手術(shù)組(Sham operated,n=3)、單純膠原組(PBS/Collagen, n=5)和CBD-bFGF復(fù)合膠原材料組(CBD-bFGF/Collagen, n=5),取下腹部旁正中
4、切口暴露膀胱,切除50%~60%膀胱,分別用CBD-bFGF/Collagen材料及PBS/Collagen材料進(jìn)行膀胱重建。術(shù)后1月內(nèi)單純膠原組及CBD-bFGF復(fù)合膠原材料組各有一條比格犬死亡,尸檢后提示原因?yàn)榘螂讎?yán)重感染導(dǎo)致膀胱破裂,進(jìn)一步引起腹腔感染而死亡。各組剩下比格犬全部存活,無尿漏、感染發(fā)生。
第二部分:兩種修復(fù)材料對比格犬膀胱重建修復(fù)作用評價(jià)。
術(shù)后6月,我們對所有比格犬的膀胱進(jìn)行了形態(tài)學(xué)、組織學(xué)及功
5、能學(xué)檢測,評價(jià)兩種修復(fù)材料對比格犬膀胱重建修復(fù)作用。尿動(dòng)力學(xué)分析結(jié)果:膀胱最大容量和順應(yīng)性在PBS/Collagen組、CBD-bFGF/Collagen組、Sham operated組依次增加,3組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而CBD-bFGF/Collagen組和Sham operated組逼尿肌最大壓力比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。靜脈腎盂造影及逆行膀胱造影結(jié)果:腎臟、輸尿管正常顯影,膀胱輪廓清晰,形態(tài)正常。大
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