Myocardin基因在脂肪干細(xì)胞向平滑肌細(xì)胞分化中的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 4 級博士學(xué)位論文M y o c a r d i n 基因在脂肪干細(xì)胞向平滑肌細(xì)胞分化中的作用及其機(jī)制研究T h e I n V e s t i g a t i o n o nt h eF u n c t i o na n d M e c h a n i s m o fM y o c a r d i ⅡG e n e d u r i n g A d i p o s e D e r i V e d S t e m

2、C e l l sd i f f e r e n t i a t i n gi n t oS m o o t h M u s c l e C e l l si n Ⅵt r o課題來源：國家自然科學(xué)基金( 8 1 1 7 0 5 6 6 )廣東省自然科學(xué)基金( S 2 0 1 2 0 1 0 0 0 9 0 9 1 )廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目( 2 0 0 9 8 0 1 0 9 0 0 0 0 9 )專 業(yè) 名 稱 外科學(xué) 泌尿外科學(xué)位申請

3、人 張濤指 導(dǎo) 教 師答辯委員會主席答辯委員會成員論文評閱人韋安陽教授高 新教授胡衛(wèi)列教授謝克基教授譚萬龍教授吳艽副教授2 0 1 4 年5 月7 日 廣州摘要( s m o o t h e l i n ) 、堿性調(diào)寧蛋白( c a l p o n i n ) 表達(dá)明顯下降，C C S M 細(xì)胞數(shù)量減少及細(xì)胞舒縮功能受損。因此，D I E D 的發(fā)生與c c s M 細(xì)胞的病理改變和缺失密切相關(guān)，目前尚缺乏從根本上改善這些病理狀態(tài)的理想

4、方法。隨著基因工程技術(shù)和干細(xì)胞技術(shù)的不斷發(fā)展和應(yīng)用，給解決這一難題帶來了希望。脂肪干細(xì)胞( a d i p o s e ．d 耐v e ds t e m c e l l s ，A D S c s ) 具有自我更新和多向分化潛能，經(jīng)誘導(dǎo)后在體外可分化為多種細(xì)胞，取材方便，由脂肪組織提取后增長速度較快，可自體移植。同時，A D s c s 具有誘導(dǎo)多向分化性和表觀修飾后能表達(dá)特定外源目的基因，其無論在體內(nèi)還是體外都具有很強(qiáng)的可塑性，用誘導(dǎo)分

5、化后的A D s c s 來替代病理改變或缺失的細(xì)胞，恢復(fù)組織和器官的生理功能，達(dá)到治療疾病的目的，可行性強(qiáng)，應(yīng)用前景廣闊，被認(rèn)為是未來再生醫(yī)學(xué)中較為理想的種子細(xì)胞。M y o c a r d i n 是一種核受體轉(zhuǎn)錄因子蛋白，在S M C 分化過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用，其調(diào)控s M c 分化的機(jī)制主要是通過與血清效應(yīng)因子( s 朗l m r e s p o n s ef a c t o r ，s R F ) 結(jié)合而發(fā)揮作用。有學(xué)者將M

6、 y o c a r d i n 基因修飾的骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞( b o n e m a r r o w m e S e n c h y I n a ls t 鋤c d l s ，B M s c s ) 注入心肌梗死小鼠模型的梗死部位，發(fā)現(xiàn)M y o c a r d i n 基因修飾的B M s C s 向平滑肌樣細(xì)胞分化，同時發(fā)現(xiàn)小鼠左室功能明顯提高。另外，M a d o n n a 等人使小鼠A D S c s 高表達(dá)m y o c

7、a r d i n A ( M y o c a r d i n 的一個亞型) ，結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)基因修飾的A D S C s 在一定時間內(nèi)會出現(xiàn)肌細(xì)胞樣收縮，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)這些細(xì)胞均表達(dá)s M A 。大量研究發(fā)現(xiàn)，基因修飾干細(xì)胞治療E D 較單純基因治療和干細(xì)胞治療更具優(yōu)勢?；蛐揎椄杉?xì)胞治療是利用載體將目的基因轉(zhuǎn)移到干細(xì)胞內(nèi)，使干細(xì)胞獲得新的性狀，再通過體內(nèi)回輸而矯正體內(nèi)異常的基因表達(dá)和病變細(xì)胞，從而達(dá)到治療疾病的目的。慢病毒載體由于具有攜

8、帶基因片段容量大，轉(zhuǎn)染效率較高，目的基因可在宿主細(xì)胞中長時間穩(wěn)定表達(dá)，以及安全性好等諸多優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)已成為轉(zhuǎn)移目的基因的理想載體。因此，我們認(rèn)為若將m y o c a r d i n 基因修飾后的A D s c s 移植到陰莖海綿體內(nèi)，通過增加c c s M 細(xì)胞的數(shù)量及修復(fù)其舒縮功能，無疑將會使D I E D 的治療達(dá)到一個新的高度，但目前國內(nèi)外還未見有此方面的報(bào)道。本研究從體外探討m y o c a r d i n 基因轉(zhuǎn)染對大鼠A D