大豆花葉病毒毒株間的交叉保護作用研究及HC-Pro基因的克隆分析.pdf

1、大豆花葉病毒(Soybean Mosaic Virus，SMV)病是世界性病害，分布非常廣泛，嚴重影響大豆的產(chǎn)量和外觀品質(zhì)。國內(nèi)外學者對大豆花葉病毒株系間的交叉保護作用進行了一定研究，本研究的目的是以來源不同的SMV毒株為材料，研究交叉保護現(xiàn)象在SMV上存在的普遍性；研究不同類型保護處理組合間保護效果的差異以及接種間隔和接種處理方法對交叉保護效果的影響；研究交叉保護作用對大豆部分性狀的影響，為探索交叉保護作用在防治大豆花葉病毒病上的應用

2、奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下： 1.鑒定了54個SMV毒株在7個大豆品種上的癥狀反應。結(jié)果表明，同一SMV毒株在不同大豆品種上的癥狀反應不同，同一大豆品種感染不同SMV毒株的癥狀反應也不同。大豆花葉病毒在大豆植株上的癥狀類型有花葉和壞死，部分植株同時表現(xiàn)兩種癥狀。從54個SMV毒株中篩選到11個分別在不同品種上表現(xiàn)穩(wěn)定癥狀的毒株。 2.利用11個SMV毒株和5個大豆品種確定了8個交叉保護處理的組合，各處理不同間隔時間接種、

3、不同接種處理交叉保護作用研究結(jié)果表明：不同接種間隔天數(shù)即不同時間挑戰(zhàn)接種的交叉保護作用存在較明顯差異，間隔7天保護效果顯著好于3、5、9、11天。不同處理方法也影響交叉保護作用，采用先后接種兩個毒株可表現(xiàn)保護作用，兩毒株汁液等體積接種或同時各接一片真葉則不表現(xiàn)保護作用。各交叉保護處理的復合接種試驗表明，SMV毒株間存在交叉保護作用，毒株之間的交叉保護作用存在程度差異。一般以花葉毒株作為保護毒株，表現(xiàn)較高的保護作用，以壞死毒株作為保護毒株

4、，幾乎不表現(xiàn)保護作用。 表現(xiàn)較高保護作用的處理中，SMV對病情指數(shù)、葉面積、根干重的影響較小，SMV對株高、葉綠素含量、根瘤鮮重的影響在品種間存在差異。保護作用較差的處理中，SMV對病情指數(shù)、葉面積、葉綠素含量、根干重的影響較大，SMV對株高、根瘤鮮重的影響在品種間存在差異。 3.采用TA克隆的方法測定了6個SMV毒株的HC-Pro基因序列，得到的HC-Pro基因全長均為1371nt，推導的氨基酸序列為457個氨基酸殘基

5、。核苷酸及氨基酸序列分析表明，HC-Pro蛋白擁有行使功能的結(jié)構(gòu)域：與病毒移動有關(guān)的CCC基序和與病毒CP中DAG基序結(jié)合的PTK基序。6個SMV毒株的HC-Pro基因同源性較高，核苷酸同源性為89.2％～99.9％，氨基酸同源性為95.4％～99.8％，其中親緣關(guān)系最近的是TS216和4434，僅有1個堿基差異。在13個SMV毒株中，HZ1與其余12個毒株親緣關(guān)系稍遠。研究表明，SMV毒株的HC-Pro基因同源性與毒株在鑒別寄主上的致