8周有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠右心室肌蛋白質(zhì)組差異表達(dá)的影響.pdf

1、目的：心肌蛋白質(zhì)是心臟結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)，長期系統(tǒng)的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可使心肌結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生變化，這必然導(dǎo)致心肌蛋白質(zhì)的表達(dá)量和質(zhì)發(fā)生變化。本研究從蛋白質(zhì)組學(xué)整體、定量的角度，探討SD大鼠在8周中小強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)條件下，右心室肌蛋白質(zhì)組的差異表達(dá)及其規(guī)律，初步篩選出在運(yùn)動(dòng)應(yīng)激條件下對(duì)心臟重塑發(fā)揮重要作用的目標(biāo)蛋白質(zhì)。為深入研究國民體質(zhì)健康的運(yùn)動(dòng)干預(yù)，也為慢性心血管疾病的運(yùn)動(dòng)康復(fù)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：以20只雄性SD大鼠為研究對(duì)象，按照體

2、重隨機(jī)分為運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組(n=10)。運(yùn)動(dòng)組經(jīng)8周中小強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)跑臺(tái)訓(xùn)練后6h，與對(duì)照組同時(shí)麻醉處死，提取右心室肌的全蛋白進(jìn)行雙向凝膠電泳技術(shù)分離；運(yùn)用Bio PD quest圖像分析軟件對(duì)雙向凝膠電泳圖譜進(jìn)行分析，選取運(yùn)動(dòng)后差異表達(dá)量≥5倍的蛋白質(zhì)點(diǎn)，用串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜蛋白質(zhì)儀進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)的基因表達(dá)進(jìn)行mRNA轉(zhuǎn)錄水平上的檢測。
　　 結(jié)果：經(jīng)過8周運(yùn)動(dòng)后，與對(duì)照組相比運(yùn)動(dòng)組

3、心臟重量指數(shù)增加32.0％，具有顯著性差異(p＜0.05)。2-DE圖譜上8周運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組檢測到的蛋白質(zhì)點(diǎn)分別為547±18和530±14個(gè)；運(yùn)動(dòng)后共有58個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)發(fā)生了變化，其中表達(dá)量上調(diào)≥2倍的點(diǎn)有33個(gè)，上調(diào)≥5倍的點(diǎn)有8個(gè)，下調(diào)≥2倍的點(diǎn)有25個(gè)，下調(diào)≥5倍的點(diǎn)有8個(gè)。選擇差異表達(dá)量≥5倍的16個(gè)點(diǎn)為目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行質(zhì)譜分析，共鑒定出11個(gè)蛋白質(zhì)，這些目標(biāo)蛋白質(zhì)點(diǎn)有：心肌肌動(dòng)蛋白α1運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量上調(diào)9.5倍、膜聯(lián)蛋白A6運(yùn)動(dòng)后

4、表達(dá)量上調(diào)5.4倍、丙酮酸脫氫酶E1α1運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量上調(diào)5.3倍、原肌球調(diào)節(jié)蛋白4運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量上調(diào)5.5倍、蛋白組氨酸磷酸酶運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量上調(diào)9.6倍、次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量下調(diào)9.7倍、線粒體羧甲基烯酰-CoAβ鏈運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量下調(diào)14.6倍、線粒體電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β亞基運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量下調(diào)16.1倍、線粒體酰基輔酶脫氫酶長鏈運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量下調(diào)16.7倍、線粒體烏頭酸水合酶運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量下調(diào)11.3倍和一個(gè)分子量29kDa的未知

5、蛋白運(yùn)動(dòng)后表達(dá)量上調(diào)5.3倍。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈檢測結(jié)果顯示：膜聯(lián)蛋白A6、心肌肌動(dòng)蛋白α1、蛋白組氨酸磷酸酶、線粒體羧甲基烯酰-CoAβ鏈、次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶、線粒體?；o酶脫氫酶長鏈的mRNA表達(dá)量出現(xiàn)下降；線粒體烏頭酸水合酶、原肌球調(diào)節(jié)蛋白4的mRNA的表達(dá)量出現(xiàn)上升。
　　 結(jié)論：①經(jīng)過8周中小強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)后，大鼠右心室肌蛋白質(zhì)組發(fā)生了顯著性差異表達(dá)。②采用中小強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)，心肌收縮能力增強(qiáng)，能量代謝水平和鈣離子調(diào)