4周有氧運(yùn)動(dòng)對心房肌蛋白質(zhì)組及基因差異表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　 本研究探討4周有氧運(yùn)動(dòng)對大鼠心房肌蛋白質(zhì)組差異表達(dá)的影響，篩選出心房肌中與有氧運(yùn)動(dòng)適應(yīng)密切相關(guān)的目標(biāo)蛋白質(zhì)點(diǎn)，并對部分目標(biāo)蛋白質(zhì)點(diǎn)的mRNA表達(dá)水平進(jìn)行研究，為深入研究長期規(guī)律的有氧運(yùn)動(dòng)促進(jìn)心臟健康；為全民健身運(yùn)動(dòng)及慢性心血管疾病的運(yùn)動(dòng)康復(fù)研究提供新的思路及理論依據(jù)與實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 方法：
　　 20只SD雄性大鼠按體重和運(yùn)動(dòng)能力隨機(jī)配對分為運(yùn)動(dòng)組和對照組(n=10)。采用跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)的方式，適應(yīng)性訓(xùn)

2、練后，復(fù)制24m·min-1×40min運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度負(fù)荷持續(xù)訓(xùn)練4周的有氧運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型(負(fù)荷強(qiáng)度相當(dāng)于60～70％VO2max)。最后一次訓(xùn)練后6小時(shí)，運(yùn)動(dòng)與對照組的大鼠同時(shí)麻醉處死，提取心房肌組織的全蛋白，采用雙向凝膠電泳技術(shù)對蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，運(yùn)用BioPDquest圖像分析軟件對2-DE圖譜進(jìn)行分析，并應(yīng)用串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀對其中表達(dá)量變化上調(diào)5倍以上及下調(diào)至1/5以下的13個(gè)目標(biāo)蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT

3、-PCR)技術(shù)檢測對7個(gè)目標(biāo)蛋白質(zhì)的基因表達(dá)水平檢測。
　　 結(jié)果：
　　 ①經(jīng)4周有氧運(yùn)動(dòng)后，與對照組相比，大鼠的心臟重量的百分率增加了1.7％，心重指數(shù)增加了32％(P<0.05)；②在2-DE電泳圖譜上運(yùn)動(dòng)組檢測到蛋白質(zhì)點(diǎn)370±35個(gè)，安靜對照組檢測到422±7個(gè)，運(yùn)動(dòng)后差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)共有53個(gè)，未見新增或缺失的蛋白質(zhì)點(diǎn)，其中表達(dá)量上調(diào)5倍以上的點(diǎn)有5個(gè)，下調(diào)5倍的點(diǎn)8個(gè)，對篩選出的13個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜分析

4、，成功鑒定出11種蛋白質(zhì)和一個(gè)分子量為54KDa的未知蛋白，如丙酮酸脫氫酶Elαl、甲基丙二酸半醛脫氫酶[?；鵠、絲裂素活化蛋白激酶3。③RT-PCR檢測結(jié)果：運(yùn)動(dòng)組大鼠心房肌中甲基丙二酸半醛脫氫酶、細(xì)胞質(zhì)蘋果酸脫氫酶的mRNA相對凈光密度值低于對照組(P<0.05)；線粒體二氫硫辛酸脫氫酶、谷胱甘肽合成酶、線粒體烏頭酸水合酶、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶A3的mRNA相對凈光密度值低于對照組(P>0.05)；異戊烯輔酶A脫氫酶mRNA相對凈光密

5、度值高于對照組(P>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)經(jīng)過4周有氧運(yùn)動(dòng)后，大鼠心房肌蛋白質(zhì)組差異表達(dá)顯著，包括蛋白質(zhì)點(diǎn)數(shù)目的差異變化和蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)強(qiáng)度的大幅度上調(diào)或下調(diào)。(2)質(zhì)譜鑒定出來的丙酮酸脫氫酶Elαl、線粒體烏頭酸水合酶等目標(biāo)蛋白的上調(diào)與提高心肌細(xì)胞能量代謝水平有關(guān)。絲裂素活性蛋白激酶3的上調(diào)與促使心肌細(xì)胞肥大增殖有關(guān)，表明中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)也能像大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)一樣，導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)心臟重塑，改善心臟的收縮泵血功能。(