tBHQ對顱腦創(chuàng)傷后炎癥反應(yīng)保護(hù)作用的體外研究.pdf

1、目的:Nrf2通路在顱腦創(chuàng)傷后被激活，在顱腦創(chuàng)傷后具有極為重要的保護(hù)作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，tBHQ作為Nrf2的激活劑，可以抑制小鼠顱腦創(chuàng)傷后的炎癥反應(yīng)，減輕繼發(fā)性腦損傷。本研究擬通過體外實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步探究tBHQ對顱腦創(chuàng)傷后炎癥反應(yīng)的保護(hù)作用及可能機(jī)制。
　　方法:ICR胎鼠培養(yǎng)原代神經(jīng)元細(xì)胞，待細(xì)胞成熟后，分為三組:(1)對照組;(2)TBI組;(3)TBI+tBHQ組。每組18孔細(xì)胞。處理結(jié)束24h后Western-Blot技術(shù)

2、觀察Nrf2胞漿/核含量，EMSA技術(shù)研究核內(nèi)Nrf2的DNA結(jié)合活性、NF-κB的DNA結(jié)合活性;Real-timePCR技術(shù)定量測定Nrf2-ARE通路下游因子NQO1、HO-1、GST、γGCS的mRNA表達(dá)水平;化學(xué)發(fā)光法檢測細(xì)胞上清GSH、GSSG含量;熒光發(fā)光法檢測細(xì)胞上清ROS水平。
　　結(jié)果:TBI后細(xì)胞核內(nèi)Nrf2及下游因子NQO1、HO-1、GST、γGCS表達(dá)增加，tBHQ可進(jìn)一步增加其表達(dá)水平(P＜0.05