心衰康及其拆方對(duì)慢性心衰大鼠心功能及尿液AQP2、下丘腦AVP影響的研究.pdf

1、目的：觀察心衰康及其拆方對(duì)慢性心力衰竭（CHF）大鼠一般情況及尿量的影響；測定慢性心衰大鼠的心功能及尿液水通道蛋白2（AQP2）、下丘腦精氨酸血管加壓素（AVP），探討心衰康及其拆方對(duì)心衰大鼠水液代謝的影響。
　　方法﹕選取體重250g左右的Wistar大鼠，用冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)的方法制作慢性心衰動(dòng)物模型，術(shù)后4周行超聲心動(dòng)圖檢查，將左心室射血分?jǐn)?shù)≤45％的心衰大鼠納入實(shí)驗(yàn)。將納入實(shí)驗(yàn)的心衰大鼠隨機(jī)分為6組，分別為模型組、心衰康全方組

2、、益氣組、溫陽組、活血組、利水組，另設(shè)假手術(shù)組。心衰康全方組給予心衰康全方灌胃，益氣組、溫陽組、活血組、利水組分別給予心衰康全方中的益氣、溫陽、活血、利水藥物灌胃，模型組給予同等劑量超純水灌胃。假手術(shù)組用超純水灌胃作為空白對(duì)照組。分2批進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，第1批灌藥4周、第2批灌藥8周，觀察動(dòng)物行為學(xué)、尿量，行心臟超聲測定心功能，采用蘇木精-伊紅染色法（HE染色法）觀察心臟、腎臟病理學(xué)改變；雙抗體夾心 ELISA法測定心衰大鼠尿液 AQP2濃度；

3、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR法檢測各組心衰大鼠下丘腦 AVP的表達(dá)。
　　結(jié)果﹕
　　1．對(duì)各組大鼠動(dòng)物行為學(xué)和24小時(shí)排尿量進(jìn)行觀察：各用藥組與模型組比較，均能改善大鼠一般情況；在對(duì)心衰大鼠進(jìn)行藥物干預(yù)4周后，利水組的利尿作用與益氣、溫陽、活血組比較有差異。藥物干預(yù)8周后利水組與其他拆方組比較尿量無差異，且利水組8周與4周相比增加尿量的幅度較其他各藥物干預(yù)組??；心衰康組、益氣組、活血組、利水組與模型組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其中以心衰

4、康全方和心衰康拆方中的利水藥對(duì)心衰大鼠利尿作用最為明顯。
　　2．超聲心動(dòng)圖評(píng)價(jià)：對(duì)心衰大鼠藥物干預(yù)4周后，與模型組大鼠比較，心衰康全方組及益氣、活血拆方組大鼠LVEF明顯升高，其中以心衰康全方組最為明顯，而溫陽、利水拆方組大鼠LVEF升高無顯著差異性。8周大鼠中，與模型組大鼠比較，心衰康組、益氣組、溫陽組、活血組、利水組左室射血分?jǐn)?shù)明顯增加，表明心衰康全方及益氣、活血、溫陽、利水拆方均可改善心梗后心衰大鼠心功能，其中以心衰康全方

5、最為明顯。并且隨著用藥時(shí)間的延長，溫陽、利水拆方也有提高左室射血分?jǐn)?shù)的作用，但這種作用較益氣、活血藥物弱。
　　3． HE染色法觀察心臟、腎臟病理學(xué)改變：與模型組比較，心衰康全方組、活血組、益氣組對(duì)心衰大鼠心臟病理有改善作用；心衰康全方組、活血組、益氣組、利水組、溫陽組對(duì)心衰大鼠腎臟病理有改善作用。4周組與8周組比較，心衰康全方組、益氣組和活血組隨著用藥時(shí)間的延長，其改善心臟及腎臟病理改變的作用在增強(qiáng)。
　　4．尿液水通道蛋

6、白2的檢測：在對(duì)心衰大鼠進(jìn)行藥物干預(yù)4周后，大鼠尿液中水通道蛋白2的含量較模型組比較均降低，其中心衰康全方組作用最明顯，利水組次之，且利水組較其他拆方組比較均有差異；而藥物干預(yù)8周后，心衰康全方組的效果同樣最為明顯，而利水組效果與益氣、溫陽、活血組類似。表明隨著用藥時(shí)間的延長，益氣、溫陽、活血藥對(duì)水通道蛋白2的抑制作用逐漸增強(qiáng)，而利水藥作用無明顯改變。聯(lián)系心功能指標(biāo)，這一結(jié)果與其長期應(yīng)用改善心功能、改善腎臟供血、從而對(duì)水液代謝產(chǎn)生影響有

7、關(guān)。
　　5．實(shí)時(shí)熒光定量 PCR法測定下丘腦精氨酸血管加壓素（AVP）mRNA：在對(duì)心衰大鼠進(jìn)行藥物干預(yù)4周后，大鼠下丘腦精氨酸血管加壓素（AVP） mRNA表達(dá)：心衰康組、益氣組、活血組、利水組與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明心衰康全方以及拆方中的益氣、活血、利水藥物均能降低下丘腦精氨酸血管加壓素（AVP） mRNA表達(dá)，而其中以全方組及利水組效果明顯，與益氣、溫陽、活血組比較有差異。而藥物干預(yù)8周后，心衰康全方組以及益氣、溫陽

8、、活血、利水組同樣能夠降低大鼠下丘腦精氨酸血管加壓素（AVP） mRNA表達(dá)，且各拆方組之間比較無差異，結(jié)合整個(gè)研究結(jié)果分析，心衰康及其拆方可能通過降低下丘腦AVPmRNA的表達(dá)，影響腎臟 AVP受體，作用于腎臟 AQP2，從而進(jìn)一步增加心衰大鼠的排尿量。
　　結(jié)論﹕
　　1．心衰康及其拆方均能改善心衰大鼠的一般情況，減輕心梗后心肌損傷程度，減輕腎臟組織的損傷，提高左室射血分?jǐn)?shù)，能夠改善心衰大鼠心功能，且隨著藥物干預(yù)時(shí)間的延

9、長，這種改善作用更加明顯。
　　2．心衰康及其拆方能夠降低尿液水通道蛋白2的濃度，隨著用藥時(shí)間的延長，益氣、溫陽、活血藥對(duì)水通道蛋白2的抑制作用逐漸增強(qiáng)。
　　3．心衰康及其拆方對(duì)慢性心衰的治療作用與其改善心功能、降低下丘腦 AVPmRNA的表達(dá)，從而增加排尿量有關(guān)。
　　4.對(duì)于慢性充血性心力衰竭大鼠動(dòng)物模型，以紅參、黃芪為組方的益氣藥物單獨(dú)應(yīng)用可以增加心衰大鼠的尿量，與模型組相比，尿液中水通道蛋白2的濃度降低，其機(jī)

10、制可能與降低下丘腦 AVPmRNA的表達(dá)有關(guān)。
　　5．對(duì)于慢性充血性心力衰竭大鼠動(dòng)物模型，以附子、桂枝為組方的溫陽藥物單獨(dú)應(yīng)用可以增加心衰大鼠的尿量，與模型組相比，尿液中水通道蛋白2的濃度降低，其機(jī)制可能與降低下丘腦 AVPmRNA的表達(dá)有關(guān)。
　　6.對(duì)于慢性充血性心力衰竭大鼠動(dòng)物模型，以紅花、丹參、赤芍為組方的活血藥物單獨(dú)應(yīng)用可以增加心衰大鼠的尿量，與模型組相比，尿液中水通道蛋白2的濃度降低，其機(jī)制可能與降低下丘腦 A