Exenatide對IL-1β和TNF-α誘導大鼠胰島β細胞凋亡的抑制作用.pdf

1、目的：
　　探討GLP-1受體激動劑Exenatide對IL-1β和TNF-α誘導大鼠胰島β細胞凋亡的抑制作用。
　　方法：
　　采用膠原酶原位灌注、Ficoll不連續(xù)密度梯度離心分離純化大鼠胰島細胞，將純化胰島在體外進行培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)基中是否加入Exenatide及細胞因子IL-1β和TNF-α，按隨機對照原則分為空白對照組，單獨Exenatide處理組（包括Exenatide10nmol/L、50nmol/L、10

2、0nmol/L的低、中、高劑量組，單獨細胞因子組(加IL-1β50u/ml和TNF-α250u/ml)及Exenatide+細胞因子組(Exenatide100nmol/L、IL-1β50u/ml、TNF-α250u/ml)。檢測指標包括使用吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)雙染法免疫熒光顯微鏡下觀測各處理組胰島細胞的形態(tài)和凋亡情況，比較各組胰島細胞的存活率;ELISA方法測定細胞培養(yǎng)液的胰島素含量，計算葡萄糖刺激胰島素分泌實驗中的胰島刺激

3、指數(shù)(SI)，評價胰島功能，觀察Exenatide對IL-1β、TNF-α誘導的胰島β細胞凋亡的抑制作用及促進胰島素分泌的作用。
　　結(jié)果：
　　AO/PI雙染色證明Exenatide三個劑量處理組較空白組的胰島β細胞凋亡減少，存活率升高，（P均＜0.05），并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系，在100nmol/L劑量時達到最高;單獨細胞因子處理組較空白對照組胰島細胞凋亡顯著增加(P＜0.05);而Exenatide+細胞因子聯(lián)合處理組中

4、β細胞的存活率明顯比單獨細胞因子組升高(P＜0.05)，但仍低于空白對照組(P＜0.05)。ELISA測定胰島素結(jié)果表現(xiàn)出跟胰島凋亡同樣的趨勢，其中Exenatide處理組在低糖及高糖刺激下的胰島分泌功能良好，胰島素分泌水平及刺激指數(shù)(SI)最高，空白對照組次之，細胞因子處理組胰島功能降低，胰島素分泌水平顯著低于對照組，刺激指數(shù)最小(1.85±0.19，P＜0.05)，而Exenatide+細胞因子聯(lián)合處理組與細胞因子組相比胰島分泌功能