HMGA1在甲狀腺癌細(xì)胞中對(duì)E-cadherin表達(dá)的調(diào)控作用及機(jī)理初步研究.pdf

1、目的：明確甲狀腺癌細(xì)胞中HMGA1對(duì)E-cadherin表達(dá)的調(diào)控作用及其機(jī)制；探討HMGA1對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞侵襲能力的影響。
　　方法：Western blot觀察SW579細(xì)胞中沉默HMGA1對(duì)E-cadherin蛋白表達(dá)的調(diào)控作用；PCR擴(kuò)增E-cadherin啟動(dòng)子活性序列，構(gòu)建E-cadherin啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因載體，分別轉(zhuǎn)染至 TPC-1、SW579細(xì)胞中，以熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)分析檢測(cè)HMGA1表達(dá)載體對(duì)E-cadh

2、erin啟動(dòng)子活性的影響；應(yīng)用Transwell實(shí)驗(yàn)觀察HMGA1對(duì)SW579細(xì)胞侵襲能力的影響。
　　結(jié)果：1）Western blot顯示：與空白組、scramble RNA組比較，HMGA1蛋白表達(dá)水平均下降，E-cadherin蛋白表達(dá)水平均增加，以160nmol/L組變化幅度最明顯(p<0.05)。
　　2）成功構(gòu)建 E-cadherin啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因載體，應(yīng)用相對(duì)熒光素酶活性測(cè)定發(fā)現(xiàn)在SW579細(xì)胞中，與

3、pGL4.10-E-cadherin組比較，HMGA1表達(dá)載體組的E-cadherin啟動(dòng)子活性均下降，以1μg、2μg組下降幅度明顯(p<0.05)；TPC-1細(xì)胞中，與空白組比較，HMGA1表達(dá)載體組的E-cadherin啟動(dòng)子活性均下降，以2μg組下降幅度最明顯(p<0.05)。
　　3）Transwell實(shí)驗(yàn)顯示：與空白組、scramble RNA組比較，沉默HMGA1后穿透膜的SW579細(xì)胞數(shù)明顯下降(p<0.05)。<