CD147在甲狀腺癌細(xì)胞糖酵解過(guò)程中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:了解甲狀腺癌組織是否存在糖酵解現(xiàn)象及CD147參與甲狀腺癌細(xì)胞糖酵解過(guò)程的作用及機(jī)制。
　　方法:1.運(yùn)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)甲狀腺癌組織中GLUT-1、HK2、PKM2和MCT1等糖酵解標(biāo)志蛋白的表達(dá)情況;2.運(yùn)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)CD147在不同病理類型的甲狀腺癌組織中的表達(dá)情況;3.利用CD147siRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)抑制甲狀腺癌細(xì)胞株(WRO及FRO細(xì)胞株)中CD147的表達(dá)，并應(yīng)用免疫印跡方法及免疫熒光技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染對(duì)MCT1

2、的表達(dá)的影響;應(yīng)用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞外乳酸濃度的變化;應(yīng)用pH計(jì)測(cè)定轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞外微環(huán)境中pH值的變化;4.運(yùn)用CCK-8實(shí)驗(yàn)方法觀察轉(zhuǎn)染對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞增殖能力的影響;運(yùn)用Transwell小室實(shí)驗(yàn)方法觀察轉(zhuǎn)染對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響。
　　結(jié)果:1.甲狀腺癌組織中GLUT-1，HK2，PKM2，MCT1等糖酵解標(biāo)志蛋白高表達(dá);2.不同病理組織類型的甲狀腺癌組織中CD147均為強(qiáng)表達(dá)，表達(dá)水平與組織去分化程度

3、正相關(guān)，良性甲狀腺腫瘤中CD147表達(dá)陰性;3.甲狀腺癌細(xì)胞（WRO細(xì)胞及FRO細(xì)胞）中CD147與MCT1在細(xì)胞膜上表達(dá)共存， CD147siRNA轉(zhuǎn)染后MCT1分子表達(dá)水平顯著下降，并且與CD147在細(xì)胞膜上的共表達(dá)水平下調(diào);轉(zhuǎn)染后細(xì)胞外乳酸濃度顯著下降，WRO組下降31.3％，F(xiàn)RO組下降58.5％;轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞外pH值變化顯著(P＜0.05)。4.CD147siRNA轉(zhuǎn)染后甲狀腺癌細(xì)胞（WRO細(xì)胞及FRO細(xì)胞）的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移