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文檔簡介
1、以來自中國、美國、澳大利亞等國家和地區(qū)的30個苜蓿品種(Medicago)為供試材料，用ISSR(簡單重復序列間區(qū))分子標記分析技術(shù)，探討苜蓿品種間的遺傳多樣性。所得結(jié)果如下： 1.苜蓿ISSR分析的技術(shù)體系建立：25ul反應(yīng)體系中，20-100ng模板DNA，0.5μmol/L的引物，2ul 10×PCR反應(yīng)緩沖液，0.2mmol/L dNTP，0.5U的TaqDNA聚合酶，2.0mmol/L Mg<'2> Cl<,2>。反應(yīng)
2、程序為：94℃預變性2min；94℃30s，50-55℃(退火溫度根據(jù)引物的Tm值變化1-5℃)退火30s，72℃2 min，35個循環(huán)；72℃10min；4℃保存。 2.苜蓿ISSR引物篩選與PCR擴增：在30個供試材料中，10個ISSR引物共擴增出109條帶，其中多態(tài)性帶70條，多態(tài)性比率(PPB)為64.22％。平均每個引物擴增出10.9條帶。研究不僅說明國內(nèi)外苜蓿間遺傳差異較大，在我國南北方苜蓿間也存在明顯的遺傳差異。從
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