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文檔簡介
1、人巨細胞病毒（HCMV）感染在中國人群中表現(xiàn)的特點是潛伏-再激活.HCMV抗原血癥檢測中一個主要的靶抗原是HCMV低基質(zhì)磷酸化蛋白（pp65）,即HCMVpp65抗原.用針對HCMVpp65的單克隆抗體,通過免疫熒光或酶染技術(shù)檢測患者外周血多形核細胞（PMNLs)中HCMVpp65抗原的存在,根據(jù)檢出的陽染細胞數(shù)判斷HCMV激活程度.為此,該研究旨在通過實驗室內(nèi)HCMV標準毒株AD-169感染人胚肺成纖維細胞（HELF）制備的陽性細胞片
2、作為對照,本建立并優(yōu)化HCMVpp65抗原血癥的檢測方法（免疫組化）.包括單克隆抗體、固定方法、免疫染色方法的選擇,各種試劑的有效工作濃度以及操作過程的穩(wěn)定性等.我們選擇的抗HCMVpp65的單抗為C<,10～11>和C<,2～6>兩種混合單抗,分別進行檢測,經(jīng)配對t檢驗分析無顯著差異（P>0.05）,即任何一種都可選用.在實驗室建立穩(wěn)定可行的HCMVpp65抗原血癥檢測方法的基礎(chǔ)上,用此方法與熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-PCR）兩種方
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