中低位直腸癌系膜環(huán)周切緣癌浸潤(rùn)的臨床研究.pdf

1、目的： 直腸癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率及死亡率均較高。手術(shù)治療是直腸癌的主要治療手段，隨著外科學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等學(xué)科的發(fā)展，直腸癌的手術(shù)治療也有了很大的進(jìn)展。在保證手術(shù)根治效果的同時(shí)，如何能進(jìn)一步降低局部復(fù)發(fā)率，提高患者生活質(zhì)量，一直是人們所關(guān)注的問(wèn)題。 TME手術(shù)原則的廣泛推廣，使直腸癌術(shù)后局部復(fù)發(fā)率顯著降低。以往人們對(duì)直腸癌遠(yuǎn)端腸管及系膜切除距離很關(guān)注，也做了大量相關(guān)研究，明確了遠(yuǎn)端切除的安全距離。近年來(lái)

2、，直腸系膜環(huán)周切緣癌浸潤(rùn)(circumferential margin involvement,CMI)日益受到人們的關(guān)注，而且越來(lái)越多的證據(jù)證實(shí)CMI是導(dǎo)致直腸癌術(shù)后局部復(fù)發(fā)的重要因素，因此，CMI的研究成為進(jìn)一步降低腫瘤局部復(fù)發(fā)的關(guān)鍵所在。 病理大組織切片能夠客觀且準(zhǔn)確地觀察直腸癌術(shù)后CMI的情況。這種病理學(xué)檢查方法可以從整體上觀察直腸癌轉(zhuǎn)移灶在直腸系膜內(nèi)的方位及其與腫瘤原發(fā)灶和直腸壁的關(guān)系，通過(guò)這種方法可以準(zhǔn)確地觀察手術(shù)切

3、緣情況，判斷是否存在CMI。同時(shí)結(jié)合免疫組化技術(shù)，可以發(fā)現(xiàn)環(huán)周切緣存在的腫瘤微轉(zhuǎn)移病灶，從而進(jìn)一步增加CMI的檢出率。 本研究通過(guò)HE染色病理大組織切片與免疫組化大切片相結(jié)合，探討如何能進(jìn)一步提高CMI的檢出率，并與41例臨床病例資料相結(jié)合，發(fā)現(xiàn)CMI的存在規(guī)律，指導(dǎo)臨床治療。 方法： 1.HE染色病理大組織切片：通過(guò)大組織切片觀察CMI情況與臨床病理資料的關(guān)系，然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 2.免疫組織化學(xué)法：

4、采用S-P法，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，采用1:80、1:80、1:40稀釋的鼠抗人CK20、CDX2、MMP7單克隆抗體分別檢測(cè)直腸癌系膜內(nèi)微轉(zhuǎn)移灶，發(fā)現(xiàn)CMI的微轉(zhuǎn)移。PBS代替-抗作為陰性對(duì)照。結(jié)合臨床病理資料對(duì)其結(jié)果進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： HE染色病理組織大切片檢測(cè)CMI陽(yáng)性率為21.95％(9/41)。其中在腫瘤分化程度方面，高、中分化組CMI陽(yáng)性率分別為16.67％(1/6)、8.00％(2/25)，而

5、在低分化組CMI陽(yáng)性率高達(dá)60.00％(6/1 0)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，高、中分化組與低分化組比較存在顯著性差異(P=0.004＜0.05)，可認(rèn)為CMI在低分化組的陽(yáng)性率高于高、中分化組。在腫瘤位置(腫瘤下緣距齒線距離)方面，＜5cm組CMI陽(yáng)性率46.15％(6/13)高于≥5cm組陽(yáng)性率10.71％(3/28)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示兩組存在顯著性差異(P=0.03＜0.05)。在不同的術(shù)式方面，Miles組CMI陽(yáng)性率46.15％(6/1

6、3)高于Dixon組的陽(yáng)性率10.71％(3/28)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示兩組存在顯著性差異(P=0.03＜0.05)。而患者性別、年齡、腫瘤大體類型、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、手術(shù)方法(開(kāi)腹/腹腔鏡)方面均與CMI陽(yáng)性率無(wú)明顯相關(guān)性(P＞0.05)。 免疫組化結(jié)果顯示，CK20、CDX2、MMP7切片檢測(cè)CMI陽(yáng)性率分別為29.27％(12/41)、31.71％(13/41)、26.83％(11/41)。其中在腫瘤分化程度方面，三項(xiàng)

7、指標(biāo)均證實(shí)高、中分化組CMI陽(yáng)性率低于低分化組，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析存在顯著性差異(P＜0.05)。在腫瘤位置(腫瘤下緣距齒線距離)方面，三項(xiàng)指標(biāo)均顯示＜5cm組CMI陽(yáng)性率高于≥5cm組，統(tǒng)計(jì)學(xué)顯示存在顯著性差異(P＜0.05)。在不同的術(shù)式方面，三項(xiàng)指標(biāo)均顯示Miles手術(shù)組CMI陽(yáng)性率高于Dixon手術(shù)組，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示兩組比較存在顯著性差異(P＜0.05)。CK20、CDX2顯示患者性別、年齡、腫瘤大體類型、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、手

8、術(shù)方法(開(kāi)腹/腹腔鏡)均與CMI陽(yáng)性率無(wú)明顯相關(guān)性(P＞0.05)。在上述臨床資料方面，MMP7顯示在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，N0、N1、N2組CMI陽(yáng)性率分別為8.70％(2/23)、46.15％(6/13)、60.00％(3/5)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示N0組與N1、N2組比較存在顯著性差異(P=0.009)，可認(rèn)為無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CMI陽(yáng)性率低于存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CMI陽(yáng)性率。采用HE染色與免疫組化三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的方法共檢測(cè)出15例存在CMI，陽(yáng)性

9、檢出率為36.59％(15/41)。HE染色、CK20、CDX2、MMP7切片檢測(cè)CMI陽(yáng)性率分別為21.95％(9/41)、29.27％(12/41)、31.71％(13/41)、26.83％(11/41)，兩兩比較CMI陽(yáng)性檢出率均無(wú)明顯差異(P＞0.05)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示HE染色與免疫組化三項(xiàng)抗體指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)較單用HE染色大切片或一種抗體指標(biāo)檢測(cè)CMI檢出率高(P＜0.05)。 結(jié)論： 1病理大組織切片能客觀準(zhǔn)確地