自發(fā)性高血壓大鼠腎臟組織雙向電泳的建立與分析以及氯沙坦對(duì)其的影響.pdf

1、高血壓是一種高發(fā)病率、高致殘率、高死亡率的疾病。目前中國(guó)有1億多患者，美國(guó)有5000多萬(wàn)患者。對(duì)高血壓的治療目前已不僅僅滿足于將血壓控制至靶目標(biāo)水平，還重視和強(qiáng)調(diào)對(duì)靶器官保護(hù)。腎臟是高血壓損害的重要靶器官，研究表明，腎素—血管緊張素系統(tǒng)(RAS)在高血壓腎臟損害及血壓調(diào)節(jié)中起著重要作用。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)是RAS的關(guān)鍵酶，促進(jìn)AngⅡ的生成及緩激肽的降解。而血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)通過(guò)AngⅡ受體的抑制，起到降壓、保護(hù)心

2、臟和血管以及保護(hù)腎臟的作用。目前，在蛋白質(zhì)水平對(duì)高血壓腎臟損害的發(fā)病機(jī)制及ARB在其中起的確切作用的研究信息量還相當(dāng)有限。 蛋白質(zhì)組學(xué)是在基因組學(xué)發(fā)展的基礎(chǔ)上形成的新興學(xué)科，主要是從整體水平研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的組成及其活動(dòng)規(guī)律，涉及對(duì)蛋白質(zhì)特性、蛋白質(zhì)翻譯后修飾以及蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用研究的廣泛領(lǐng)域。雙向凝膠電泳是蛋白質(zhì)組學(xué)的主要分離技術(shù)，一次可以分離成千上萬(wàn)個(gè)蛋白質(zhì)，使得整體水平上觀察氯沙坦(Losartan)對(duì)高血壓腎

3、臟損害的影響成為可能。 本實(shí)驗(yàn)以雄性SHR大鼠為觀察對(duì)象，分為自發(fā)性高血壓大鼠組(SHR組，n=4)和高血壓Losartan干預(yù)組(SHR-L組，n=4)。兩組大鼠同等環(huán)境下飼養(yǎng)8周，SHR-L組以Losartan藥片溶于清水，按每只大鼠20mg/kg/day的量喂給，SHR組每天等量清水喂給。8周后處死取腎臟組織，提取總蛋白。兩組蛋白樣品用雙向凝膠電泳分離，電泳后的凝膠以硝酸銀進(jìn)行染色，并用Imagemaster2Dv5.0軟

4、件對(duì)電泳結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和圖象分析，建立蛋白質(zhì)差異表達(dá)譜。結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)雙向凝膠電泳技術(shù)，對(duì)自發(fā)性及Losartan干預(yù)后高血壓大鼠腎臟組織進(jìn)行分析，成功構(gòu)建兩組腎臟蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜。分析兩組高血壓大鼠腎臟蛋白質(zhì)表達(dá)譜的差異，發(fā)現(xiàn)兩組凝膠的平均蛋白點(diǎn)數(shù)分別為570±48、686±30，平均匹配率分別為74.05％、65.9％。兩組經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析有顯著差異點(diǎn)13個(gè)，Losartan干預(yù)后表達(dá)增強(qiáng)的有4個(gè)，表達(dá)降低的4個(gè)，蛋白點(diǎn)消