吡哆胺和替米沙坦對(duì)腎小管上皮細(xì)胞及自發(fā)性高血壓大鼠腎小管形態(tài)的影響.pdf

1、目的:通過(guò)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)整體動(dòng)物模型及人腎小管上皮細(xì)胞株(HK-2)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),探討吡哆胺和替米沙坦對(duì)原發(fā)性高血壓腎小管上皮損害的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。
　　 方法:1、22周齡雄性SHR48只作為高血壓實(shí)驗(yàn)組,隨機(jī)分高血壓對(duì)照組蒸餾水2ml/d灌胃,替米沙坦組替米沙坦6mg·kg-1·d-1灌胃,吡哆胺組吡哆胺200mg·kg-1·d-1灌胃,替米沙坦+吡哆胺聯(lián)合組替米沙坦6mg·kg-1·d-1及吡哆胺2

2、00mg·kg-1·d-1灌胃。同周齡雄性威斯塔京都大鼠13只為正常對(duì)照組蒸餾水2ml/d灌胃。干預(yù)16周后,測(cè)定24小時(shí)尿微量白蛋白,腎臟組織切片蘇木精-伊紅染色、Masson染色及透射電鏡觀測(cè)腎小管上皮及間質(zhì)情況；2、HK-2細(xì)胞培養(yǎng)并分為HK-2正常對(duì)照組,血管緊張素Ⅱ(10-6 mol/l)對(duì)照組(AngⅡ組),替米沙坦(10-6 mol/l)組,吡哆胺(1mmol/L)組,吡哆胺(10mmol/L)組,替米沙坦(10-4 mo

3、l/l)+吡哆胺(10mol/L)聯(lián)合組。四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測(cè)HK-2細(xì)胞增殖情況,流式細(xì)胞儀檢測(cè)活性氧簇(ROS)生成,熒光實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF—β1)、晚期糖基化終產(chǎn)物受體(RAGE)mRNA表達(dá)量。
　　 結(jié)果:
　　 1、與高血壓組比較,替米沙坦組、聯(lián)合干預(yù)組大鼠收縮壓及尿微量白蛋白排出率顯著下降(P<0.01),吡哆胺組僅有尿微量白蛋白排出率下降(P<0.01),收縮壓

4、無(wú)變化(P>0.05);各組間血清肌酐及尿素氮水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　 2、高血壓組大鼠出現(xiàn)腎小管萎縮,腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn),纖維性物質(zhì)明顯增多,三個(gè)干預(yù)組腎小管、腎間質(zhì)形態(tài)明顯改善。
　　 3、與正常對(duì)照組比較,AngⅡ組HK-2細(xì)胞增殖受到抑制(P<0.05),替米沙坦組細(xì)胞增殖無(wú)明顯改變(P>0.05)；干預(yù)24h后10mmol/L吡哆胺組、聯(lián)合干預(yù)組細(xì)胞增殖受到抑制(P<0.01)；干預(yù)48h后,聯(lián)

5、合干預(yù)組的抑制增殖作用大于單用吡哆胺組(P<0.01)。
　　 4、與AngⅡ組比較,1mmol/L和10 mmol/L濃度的吡哆胺均可使ROS生成明顯減少(P<0.01),聯(lián)合干預(yù)組ROS生成也明顯減少(P<0.01),但與單用吡哆胺組比較沒(méi)有差別(P>0.05)。
　　 5、與AngⅡ組相比,替米沙坦組、吡哆胺組、聯(lián)合干預(yù)組HK-2細(xì)胞RAGE、TGF—β1 mRNA表達(dá)降低(P<0.05)。與替米沙坦組和吡哆胺組比