NOTCH信號(hào)分子在乳腺癌中的表達(dá)及相關(guān)因素的研究.pdf

1、　　目的 研究Notch信號(hào)通路中的幾個(gè)重要蛋白分子Notch1、Notch3和Notch4受體及JAGGED1和DLL4配體基因在乳腺癌中的表達(dá)及其與乳腺癌相關(guān)因素的關(guān)系,以探討Notch信號(hào)通路在人類(lèi)乳腺癌中的作用,并為乳腺癌治療中針對(duì)Notch系統(tǒng)的靶向藥物研究與開(kāi)發(fā)提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法 收集乳腺癌患者的癌標(biāo)本62例,癌旁標(biāo)本22例,并將癌標(biāo)本分組。用Trizol等提取標(biāo)本總RNA,設(shè)計(jì)內(nèi)參照β-actin基因及目

2、的基因Notch1、Notch3、Notch4、JAG1和DLL4的PCR特異引物,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)方法擴(kuò)增這六個(gè)基因特定的基因片段。以人乳腺癌細(xì)胞株(MDA-MB-435S)及A4癌標(biāo)本為陽(yáng)性對(duì)照,對(duì)擴(kuò)增的基因片段進(jìn)行測(cè)序,以確定其為目的基因片段。RT-PCR產(chǎn)物用2%普通瓊脂糖凝膠電泳,在凝膠分析系統(tǒng)下拍照并獲得其灰度值,同一標(biāo)本的待測(cè)基因與其β-actin基因的灰度值之比即為其半定量數(shù)值(即反映mRNA相對(duì)

3、表達(dá)水平或強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)化系數(shù)),以SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間標(biāo)準(zhǔn)化系數(shù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果
　　1.Notch受體及配體在乳腺癌標(biāo)本與癌旁標(biāo)本中的表達(dá)
　　癌標(biāo)本Notch1 mRNA陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁標(biāo)本；癌旁標(biāo)本其它兩種受體和配體均無(wú)表達(dá)；表達(dá)Notch1 mRNA的癌標(biāo)本,其N(xiāo)otch1 mRNA標(biāo)準(zhǔn)化系數(shù)高于表達(dá)Notch1 mRNA的癌旁標(biāo)本。
　　2.Notch受體及配體在乳腺癌中的表達(dá)