2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、主要組織相容性復(fù)合體(MHC)是廣泛存在于脊椎動物體內(nèi)與免疫功能密切相關(guān)的高度多態(tài)基因群。研究表明,MHCⅡ類抗原與許多動物疾病的抗病性、感病性密切相關(guān)。MHC作為一種內(nèi)在因子,其變異模式被認(rèn)為在兩棲動物數(shù)量的下降中起了關(guān)鍵作用。棘胸蛙(Quasipaa spinosa),又被稱為石雞,是我國棘蛙屬中分布范圍最廣的物種之一,目前主要分布在長江以南地區(qū)。人類活動不僅破壞了野生棘胸蛙的生活環(huán)境,而且使得野生棘胸蛙資源被過渡開發(fā)利用,加之全球

2、變暖引起的疾病傳播,導(dǎo)致棘胸蛙種群數(shù)量不斷下降。為保護(hù)棘胸蛙資源,研究與其免疫力有關(guān)的MHC基因具有重要意義。
  為研究MHC等位基因與棘胸蛙對疾病抵抗力的相關(guān)性,隨機(jī)選取100只健康棘胸蛙腹腔注射嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydropfila)進(jìn)行人工感染,然后利用特異性引物,擴(kuò)增47只存活個體(抗病棘胸蛙)和53只死亡個體(易感病棘胸蛙)的MHCⅡB基因,得到了長度為186bp的外顯子2序列。挑取出402個陽性克隆進(jìn)

3、行測序,經(jīng)序列比對共得到31條不同的核苷酸序列。最終選取6條等位基因用于研究MHCⅡB類基因多態(tài)性與棘胸蛙抗病性和易感性之間的關(guān)聯(lián)。選取的6條等位基因雖然同時存在于死亡個體和存活病個體中,但它們出現(xiàn)的頻率不同??ǚ綑z驗(yàn)結(jié)果顯示,等位基因qasp-DAB*h和qasp-DAB*1在存活個體中出現(xiàn)的概率明顯高于在死亡個體中出現(xiàn)的概率,它們可能與棘胸蛙對嗜水氣單胞菌感染的抵抗性相關(guān);而等位基因qasp-DAB* e則更多的出現(xiàn)在感病個體中,說

4、明其可能與棘胸蛙對嗜水氣單胞菌的敏感性相關(guān)。
  抗病個體暫養(yǎng)在養(yǎng)殖場內(nèi)自然繁殖子代。從子一代中隨機(jī)挑選150只個體用于研究抗病子一代的抗病性及遺傳穩(wěn)定性。用本實(shí)驗(yàn)室分離并鑒定的嗜水氣單胞菌、不動桿菌(Acinetobacter Citrobacter)及檸檬酸桿菌(Werkman and Gillen)去感染子一代個體,感染后的存活率分別為90%、84%和80%,其明顯高于普通群體的存活率,并且子一代對3種病菌的抵抗力不存在顯著

5、性差異。通過測序的方法獲得子一代個體的MHCⅡB外顯子2,得到的多態(tài)性序列在親本中全都存在,并且qasp-DAB*h和qasp-DAB*1在子一代中出現(xiàn)的頻率分別為0.56和0.47,明顯高于其在普通個體中出現(xiàn)的頻率。說明這兩個抗病相關(guān)基因在子代間是可以穩(wěn)定遺傳的。因此,qasp-DAB*h和qasp-DAB*1可作為分子標(biāo)記應(yīng)用于棘胸蛙優(yōu)良品種的選育中。測定了抗病親本子一代和普通個體的白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、吞噬細(xì)胞的吞噬能力和吞噬指數(shù)等

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