油菜轉(zhuǎn)錄因子BnWRKY75基因的遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)化子的抗病性鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、油菜是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物之一，但是其容易受到眾多病原物的侵害。其中核盤菌能夠侵染油菜造成油菜莖腐等癥狀從而引起嚴(yán)重的產(chǎn)量損失。此外，包括煙草花葉病毒(TMV)在內(nèi)的一些病毒也可侵染油菜而造成損失。
　　 WRKY蛋白屬于鋅指結(jié)構(gòu)蛋白家族。先前的相關(guān)報(bào)道證實(shí)WRKY蛋白在植物防御應(yīng)答反應(yīng)中具有重要作用。本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建油菜BnWRKY75基因的正義和反義表達(dá)載體，使用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法獲得一些油菜BnWRKY75基因正義和反義轉(zhuǎn)化子，

2、并采用PCR及Real-Time PCR的方法鑒定了轉(zhuǎn)化子。
　　 比較了油菜各轉(zhuǎn)化子接種核盤菌后病斑的大小及發(fā)病進(jìn)程，用Real-TimePCR的方法檢測了各轉(zhuǎn)化子接種核盤菌后BnWRKY75、BnWRKY40及PR1基因的表達(dá)量變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，BnWRKY75基因在油菜防御核盤菌的反應(yīng)中為負(fù)調(diào)控因子。將TMV病毒接種于油菜轉(zhuǎn)化子，Real-Time PCR檢測結(jié)果表明BnWRKY75基因的轉(zhuǎn)化對(duì)TMV病毒侵染無顯著影響。

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