大豆異黃酮和姜黃素抑制良性前列腺增生的實驗研究.pdf

1、目的： 良性前列腺增生(BPH)是老年男性常見病，其發(fā)病率占老年男性首位。目前尚無有效的預防措施，各種治療方法也具有一定的缺陷。BPH一般采用手術和藥物治療，手術治療雖然效果較好，但患者接受能力差，藥物治療存在較大的副作用。因此，尋找良好的預防性藥物意義重大。以往研究顯示，飲食成分與前列腺增生的發(fā)病有關，因此選擇合適的飲食成分作為BPH的預防性藥物具有一定的可行性。 流行病學資料表明，西方國家前列腺癌的發(fā)病率明顯高于某些

2、亞洲國家，其中一個原因就在于東西方膳食結構上有明顯的差異，即在東方國家，豆制品在膳食中占有重要的地位。大豆異黃酮為植物雌激素，其主要成分為三羥異黃酮、二羥異黃酮和6-甲氧基大豆素。它對和激素作用有關的腫瘤具有抑制作用，其機制主要為大豆異黃酮具有雌激素和抗雌激素樣作用，抑制5α還原酶、酪氨酸蛋白激酶、細胞增生和血管生成等功能。姜黃是姜科植物的根莖，屬于活血中藥，姜黃素是其主要成分之一。姜黃素的抗腫瘤作用已經(jīng)成為研究的熱點，其機制主要為姜黃

3、素具有抗氧化，誘導凋亡與分化，調控癌基因、抑癌基因，調控細胞周期等作用。大豆異黃酮和姜黃素有可能成為預防良性前列腺增生的食物成份，而國內外尚無同時使用大豆異黃酮和姜黃素抑制良性前列腺增生的相關的研究。 該研究探討大豆異黃酮和姜黃素單獨應用和聯(lián)合應用對前列腺增生的體外、體內的抑制作用；并進一步揭示大豆異黃酮和姜黃素預防前列腺增生的作用機制，為前列腺藥物預防提供依據(jù)。 方法： 體外實驗中對Wistar大鼠的前列腺平滑

4、肌細胞應用大豆異黃酮和姜黃素，采用MTT比色法探討大豆異黃酮和姜黃素單獨應用或聯(lián)合應用對前列腺平滑肌細胞的體外抑制作用。體內實驗中采用睪酮誘導得到前列腺增生小鼠模型，對前列腺增生模型小鼠應用大豆異黃酮和姜黃素，探討大豆異黃酮和姜黃素單獨應用或聯(lián)合應用對睪酮誘導的小鼠前列腺增生的對抗作用。機制研究中利用光學顯微鏡觀察大豆異黃酮和姜黃素對細胞凋亡的形態(tài)學改變；通過免疫組織化學法檢測細胞Bcl-2蛋白含量的改變；利用RT-PCR技術檢測大豆異

5、黃酮和姜黃素凋亡相關基因bcl-2和TERT的mRNA表達量的改變。 結果： 體外實驗MTT法測得大豆異黃酮和姜黃素均能抑制前列腺平滑肌細胞增殖，且抑制率隨劑量和作用時間的增加而逐漸增加。大豆異黃酮單獨作用24、48、72小時的半數(shù)抑制率(IC50)分別為131mg/L、73mg/L、50mg/L；姜黃素單獨作用24、48、72小時的半數(shù)抑制率(IC50)分別為60μmol/L、41μmol/L、25μmol/L。聯(lián)合應

6、用大豆異黃酮和姜黃素時，它們抑制前列腺平滑肌細胞增生的交互作用為：用藥24小時q值為1.18，表現(xiàn)為協(xié)同作用；用藥48、72小時q值分別為1.15、1.01，表現(xiàn)為相加作用。 體內實驗中，睪酮組的前列腺指數(shù)高于正常對照組(p＜0.01)，說明成功建立高雄激素誘導的前列腺增生小鼠模型。大豆異黃酮、姜黃素組和聯(lián)合用藥組的小鼠前列腺指數(shù)均低于睪酮組(p＜0.05)，而與正常對照組差別無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。大豆異黃酮的抑制率為3

7、1.97％，姜黃素的抑制率為15.74％，兩藥聯(lián)合應用時抑制率為14.21％，大豆異黃酮組的抑制率大于姜黃素組和聯(lián)合用藥組(p＜0.05)，姜黃素組與聯(lián)合用藥組差別無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。聯(lián)合應用大豆異黃酮和姜黃素時，它們對睪酮誘導的小鼠前列腺增生的抑制作用呈現(xiàn)拮抗作用(q值=0.33)。各組間睪丸重量差別無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。 大豆異黃酮和姜黃素對前列腺增生的抑制作用的機制研究顯示：大豆異黃酮和姜黃素均使前列腺平

8、滑肌細胞凋亡，細胞形態(tài)學觀察中鏡下可見凋亡小體；免疫組化試驗顯示大豆異黃酮和姜黃素均能降低前列腺平涓肌細胞的bcl-2的表達；RT-PCR結果顯示大豆異黃酮和姜黃素均能降低前列腺平滑肌細胞中bcl-2和TERT的mRNA表達量，且大豆異黃酮降低較姜黃素明顯，兩藥聯(lián)合作用呈現(xiàn)相加作用。 結論： 大豆異黃酮和姜黃素在體外實驗中可以抑制前列腺平滑肌細胞增生，并且兩藥聯(lián)合呈現(xiàn)協(xié)同或相加作用，在體內實驗中可以對抗睪酮誘導的小鼠前列