TXR1基因在鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞系中的表達.pdf

1、目的：
　　 1.通過研究人類鼻咽癌親本細胞與紫杉醇耐藥細胞中TXR1的表達情況，及TXR1的表達與鼻咽癌紫杉醇耐藥的相關性，探討其與紫杉醇耐藥的關系。
　　 2.篩選高效抑制TXR1基因表達的siRNA，用于鼻咽癌紫杉醇耐藥逆轉的研究。
　　 方法：
　　 1.從鼻咽癌親本及紫杉醇耐藥細胞中提取RNA及蛋白質，用熒光定量RT-PCR、Western-blot方法分別在mRNA水平及蛋白水平來檢測鼻咽癌細

2、胞中TXR1的表達情況。
　　 2.通過lip2000載體將TXR1基因的siRNA導入鼻咽癌耐藥細胞，24小時后提取的蛋白質，來檢測不同siRNA對TXR1表達的影響。
　　 結果：
　　 1.TXR1在鼻咽癌親本細胞、紫杉醇耐藥細胞中均有表達，及耐藥細胞中TXR1的含量比相對應親本細胞中的含量高，且與耐藥指數(shù)呈正相關(R2=0.979)。
　　 2.四條TXR1基因的siRNA(siRNA TXR1-

3、22、TXR1-311、TXR1-654、Negative control FAM)，通過lip2000分別轉染鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞HNE-2/Taxol，轉染24 h后，提取蛋白，利用Western blot技術在蛋白水平檢測不同siRNA對靶基因TXR1表達的影響，結果顯示TXR1-22對靶基因的抑制作用最強。
　　 3.Negative control FAM轉染的細胞在倒置熒光顯微鏡下計數(shù)，得到較高的轉染率(＞85％)，