HLA-DRB1-0701轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建及相關驗證.pdf

1、[目的]
　　制備攜帶人類銀屑病易感基因HLA-DRB1*0701的轉(zhuǎn)基因小鼠，并對其遺傳狀況、相關生化指標進行檢測，以期獲得具有人類銀屑病樣病理變化特征且能穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因小鼠模型，為銀屑病發(fā)病機理和治療藥物的研究提供有效的動物模型。
　　[方法]
　　從銀屑病患者血液標本中提取HLA-DRB1*0701基因的cDNA序列并構(gòu)建重組質(zhì)粒。通過顯微注射建立HLA-DRB1*0701轉(zhuǎn)基因FVB小鼠，采用PCR篩選陽性鼠

2、。研究轉(zhuǎn)基因小鼠的遺傳穩(wěn)定性，并利用經(jīng)典育種方法篩選純合子。通過RT-PCR方法檢測目的基因mRNA水平的表達情況。觀察轉(zhuǎn)基因鼠背部皮膚的組織學變化，檢測轉(zhuǎn)基因鼠皮膚組織中的CD4、CD8、IL-8和HLA-DR表達。
　　[結(jié)果]
　　成功構(gòu)建HLA-DRB1*0701轉(zhuǎn)基因小鼠模型，篩選出含HLA-DRB1*0701基因的純合子小鼠。通過實驗證明，HLA-DRB1*0701轉(zhuǎn)基因小鼠在皮膚組織中有目的基因mRNA水平的表

3、達，小鼠皮膚經(jīng)HE染色后可以觀察到轉(zhuǎn)基因鼠皮膚組織學特征與對照鼠相比較有明顯變化，免疫組化方法檢測轉(zhuǎn)基因鼠皮膚中CD4、CD8、IL-8和HLA-DR的分布定位基本與人類銀屑病病理學改變相似，且含量均顯著高于對照組(P＜0.05)。
　　[結(jié)論]
　　成功構(gòu)建HLA-DRB1*0701轉(zhuǎn)基因小鼠，并通過實驗驗證了HLA-DRB1*0701轉(zhuǎn)基因小鼠模型與人類銀屑病病理變化的相似性，為銀屑病動物模型的制備研究提供了理論依據(jù)和實