小鼠吸煙早期戒煙后肺泡巨噬細(xì)胞的肺內(nèi)表達(dá)水平的研究.pdf

1、目的：
　　 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用被動(dòng)吸煙小鼠模型,探討小鼠吸煙早期戒煙后肺泡巨噬細(xì)胞表達(dá)水平的變化。
　　 實(shí)驗(yàn)材料及方法：
　　 一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組
　　 選取8周齡健康雌性C57BL/6J小鼠(SPF級(jí)),30只,體重20g左右,由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,常規(guī)飼料自由飲水,溫度22±1℃,濕度50％左右,明/暗周期為12h。實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分成對(duì)照組(N)5只,吸煙組(S)15只,戒煙組(SC)10只。吸煙

2、組于吸煙4周、5周、8周后取材,戒煙組分別于吸煙4周后戒煙1周、4周后取材,對(duì)照組于4周取材。
　　 二、被動(dòng)吸煙模型
　　 將吸煙組及戒煙組小鼠每天放入自制的煙熏艙(100cm×50cm×50cm),每次暴露于10支紅金龍牌香煙,1h/d,2次/天,間隔時(shí)間大于6小時(shí),5天/周。戒煙組于熏煙滿4周后,脫離煙草環(huán)境,戒煙1周及4周后取材。
　　 三、主要實(shí)驗(yàn)方法
　　 (一)肺組織病理:HE染色。

3、　　 (二)肺組織免疫組化染色觀察肺泡巨噬細(xì)胞的肺內(nèi)表達(dá)水平。
　　 (三)應(yīng)用IPP6.0軟件測(cè)量免疫組化圖片的平均光密度。
　　 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　 應(yīng)用SPSS16.0軟件進(jìn)行分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s),樣本組間比較方差齊采用LSD及SNK檢驗(yàn),方差不齊時(shí)采用非參數(shù)檢驗(yàn),P值＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1、肺組織病理發(fā)現(xiàn)吸煙組小鼠氣道粘膜下炎性細(xì)胞浸

4、潤(rùn)較正常同齡鼠明顯增加,隨著吸煙時(shí)間的延長(zhǎng),氣道炎癥反應(yīng)逐漸加重,但是戒煙1周和4周后氣道粘膜下和血管周圍炎性細(xì)胞均未回復(fù)至正常水平。
　　 2、與對(duì)照組相比,吸煙組肺泡巨噬細(xì)胞表達(dá)水平明顯升高(P＜0.05),并隨著吸煙時(shí)間的延長(zhǎng),逐漸增加;雖然戒煙組肺泡巨噬細(xì)胞的表達(dá)水平不及繼續(xù)吸煙組,但均未恢復(fù)至戒煙前水平,甚至在戒煙4周時(shí)觀察到更多的肺泡巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)。
　　 結(jié)論：
　　 吸煙早期戒煙后肺內(nèi)存在著持續(xù)甚