補腎安胎方及其補腎、益氣活血組分對胚泡著床障礙小鼠干預的比較研究.pdf

1、本研究分為三部分：
　　 第一部分：建立吲哚美辛誘導胚泡著床障礙小鼠模型并觀察補腎安胎方及其補腎、益氣活血組分對模型小鼠胚泡著床療效觀察
　　 目的：觀察補腎安胎方及其補腎、益氣活血組分對吲哚美辛誘導著床障礙小鼠胚泡著床療效并探討其作用機制。
　　 方法：將孕鼠隨機分為正常組、模型組、補腎安胎組、補腎組和益氣活血組。妊娠第3和4 天，分別于上午8:00～9:00，下午4:00～5:00 間正常組小鼠兩次皮下注射麻

2、油0.12ml，其余四組皮下注射吲哚美辛油劑0.12ml，造成小鼠胚泡著床障礙的動物模型。分別收集妊娠第5、6、8 天小鼠子宮，計數(shù)著床位點個數(shù)并比較其大小形態(tài)。
　　 結(jié)果：與正常組比較，模型組的著床位點數(shù)顯著降低；與模型組比較，補腎安胎組小鼠著床位點數(shù)顯著提高，雖補腎組、益氣活血組著床位點數(shù)有所增加，但無統(tǒng)計學意義；補腎組、益氣活血組小鼠著床位點數(shù)較補腎安胎組少，但也沒有統(tǒng)計學意義。
　　 形態(tài)學肉眼觀，在第5、6

3、天，模型組胚泡分布明顯不均，且比正常組?。慌c模型組比較，補腎安胎組胚泡左右兩側(cè)子宮分布均勻，且胚泡大小與正常組相當，而補腎組、益氣活血組胚泡分布尚均勻，較正常組及補腎安胎組稍小。在妊娠第8 天，模型組胚泡大小形狀不一，各胚泡之間發(fā)生融合；而補腎安胎組、正常組胚泡大小均等，形狀規(guī)則，胚泡間界限清楚，無相互融合現(xiàn)象；補腎組、益氣活血組胚泡大小較均勻，但有融合現(xiàn)象發(fā)生。
　　 結(jié)論：單獨使用補腎或益氣活血的方法在胚泡著床障礙方面有一定

4、的治療作用，但不能明顯提高小鼠著床位點數(shù)，而將補腎和益氣活血集為一體的補腎安胎方則可以明顯提高小鼠著床位點數(shù)，改善胚泡的形態(tài)和宮內(nèi)的分布。
　　 第二部分：補腎安胎方及其補腎、益氣活血組分調(diào)節(jié)胚泡著床障礙小鼠雌、孕激素及其受體的實驗研究
　　 目的：比較補腎安胎方及其補腎、益氣活血組分對著床障礙小鼠雌、孕激素及其受體的影響。
　　 方法：分組和造模方法同第一部分。妊娠小鼠第5、6 天留取血清和子宮標本，采用放射免

5、疫法檢測血清中雌、孕激素含量；采用免疫組織化學技術(shù)檢測小鼠子宮雌、孕激素受體表達。
　　 結(jié)果：補腎安胎方可以提高血清中第5、6 天P 水平以及第6 天E2 水平，并且促進著床局部ER、PR的表達。而補腎方、益氣活血方雖有輕度促進ER、PR 作用，但是改善程度弱于補腎安胎方。
　　 結(jié)論：將補腎法和益氣活血法結(jié)合起來的補腎安胎方可以通過對E2、P、ER、PR的影響，更大程度上改善著床障礙小鼠子宮內(nèi)膜容受性，促進胚泡著床。

6、
　　 第三部分：補腎安胎方及其補腎、益氣活血組分對胚泡著床障礙小鼠VEGF 影響的實驗研究
　　 目的：比較補腎安胎方及其補腎、益氣活血組分對胚泡著床障礙小鼠VEGF的影響。
　　 方法：分組和造模方法同第一部分。在小鼠妊娠第5、6 天(Pd5、6)，各組均取妊娠子宮。采用免疫組織化學法測定VEGF 蛋白的表達，采用RT-PCR的方法檢測VEGFmRNA的含量。
　　 結(jié)果：與正常組比較，模型組小鼠子宮

7、內(nèi)膜中VEGF 蛋白和mRNA 顯著降低；與模型組比較，補腎安胎組小鼠子宮內(nèi)膜中VEGF 蛋白和mRNA均顯著提高；而補腎組和益氣活血組VEGF 蛋白和mRNA(除第六天補腎組外)雖稍有增高，但差別無統(tǒng)計學意義。雖然補腎安胎組、補腎組、益氣活血組三組VEGF 蛋白和mRNA的比較并不是完全統(tǒng)一，但是從總體上，補腎組、益氣活血組小鼠子宮內(nèi)膜中VEGF 蛋白和mRNA 還是較補腎安胎組弱。
　　 結(jié)論：補腎安胎方可以提高著床障礙小鼠