缺血預(yù)處理對體外循環(huán)肺損傷的保護作用及機制的實驗研究.pdf

1、目的:通過觀察肺缺血預(yù)處理(Ischemic preconditioning，IP)對犬體外循環(huán)肺缺血再灌注后的保護作用及水通道蛋白1(AQP1)的表達，來探討CPB肺損傷的機制。
　　 方法:實驗用健康雜種犬12只，雌雄不限。隨機分為兩組，對照組（C組，n=6）和缺血預(yù)處理組（Y組，n＝6）。兩組動物均腹腔注射戊巴比妥鈉(25 mg·kg-1)麻醉固定后行氣管插管，股動、靜脈置管監(jiān)測中心靜脈壓(CVP)、平均動脈壓(MAP)，

2、開胸后分離左、右肺動脈并建立犬體外循環(huán)模型。C組在左肺行缺血再灌注，Y組在阻斷左肺動脈前進行肺缺血預(yù)處理。于體外循環(huán)管道建立后轉(zhuǎn)機前(T1)、阻斷左肺動脈前(T2)停機時(T3)、停機后2h(T4)取肺組織及動脈血，行動脈血氣分析計算呼吸指數(shù)(RI)和氧合指數(shù)(OI)，開放左肺動脈行再灌注2.5h后，左肺及右肺肺功能變化比例的計算。取肺組織用Western-blot技術(shù)檢測AQP1蛋白質(zhì)表達，光鏡下觀察肺組織病理學(xué)變化。實驗結(jié)束前分別對

3、左右肺灌注5％的小牛血清蛋白檢查肺水通透性。
　　 結(jié)果:(1)呼吸功能參數(shù)變化:兩組體外循環(huán)前T1時點P(A-α)O2、RI和OI無明顯變化(P＞0.05)。組內(nèi)比較:與T1時點比較，兩組T3、T4時點P(A-a) O2和RI逐漸升高，OI逐漸降低(P＜0.05);組間比較:與對照組相比，預(yù)處理組T3、T4時點P(A-a)、O2和RI明顯低于對照組，OI則相反(P＜0.05)。
　　 (2)肺組織AQP1蛋白質(zhì)表達的變

4、化:兩組犬體外循環(huán)前肺組織AQP1蛋白質(zhì)表達量均無明顯差異(P＞0.05)。組內(nèi)比較:兩組CPB后各時間點較CPB前AQP1蛋白質(zhì)表達量逐漸下降(P＜0.05)。組間比較:與對照組相比，預(yù)處理組T3、T4時點AQP1蛋白質(zhì)表達量明顯高于對照組(P＜0.05)。
　　 (3)肺泡液體清除率:停機2h后，與對照組比較，預(yù)處理組肺泡液體清除率明顯高于對照組(P＜0.05)。
　　 (4)肺濕質(zhì)量/干質(zhì)量比測定:兩組犬阻斷左肺動

5、脈前T1、T2時點肺組織肺濕/干比值均無明顯差異（＞0.05）。組內(nèi)比較:與T1時點比較，兩組T3、T4時點濕/干比逐漸上升（P＜0.05）。組間比較:與對照組相比，預(yù)處理組T3、T4時點濕/干比明顯低于對照組（P＜0.05）。
　　 (5)肺功能變化比例:左肺動脈再灌注2.5小時后與基礎(chǔ)值比較。組間比較:預(yù)處理組肺順應(yīng)性、氧合指數(shù)及呼吸指數(shù)的惡化程度明顯較對照組低（P＜0.05）;對照組左肺順應(yīng)性、氧合指數(shù)及呼吸指數(shù)的惡化程度

6、較對照組右肺明顯增高（P＜0.05）。
　　 (6)肺組織光鏡下病理改變及病理評分:光鏡學(xué)結(jié)果:兩組實驗犬CPB前肺組織結(jié)構(gòu)清晰，肺泡腔內(nèi)未見填充物、間隔無明顯增寬;CPB后，肺泡毛細血管擴張，炎性細胞浸潤增加，肺泡腔見水腫液;T3、T4時點肺組織結(jié)紊亂，肺泡壁部分斷裂、間隔逐漸增寬、毛細血管擴張明顯，局部肺泡腔塌陷，肺泡腔見水腫液及紅細胞。病理切片評分:兩組犬阻斷左肺動脈前T1、T2時點肺組織病理評分無明顯差異（P＞0.05）

7、。組內(nèi)比較:與T1時點比較，兩組T3、T4時點病理評分逐漸增高(P＜0.05);組間比較:與對照組相比，預(yù)處理組T3、T4時點病理評分明顯低于對照組（P＜0.05）。
　　 結(jié)論:(1)缺血預(yù)處理可降低CPB犬呼吸指數(shù)，提高其氧合指數(shù)、肺的動態(tài)順應(yīng)性。改善犬的肺功能，減輕犬肺缺血/再灌注損傷，對犬CPB肺有一定的保護作用。(2)CPB導(dǎo)致肺損傷時，肺AQP1表達下降;缺血預(yù)處理可使肺AQP1表達增加，提高肺泡液體清除率，AQP1