血紅素加氧酶-1對體外循環(huán)肺損傷作用及機制研究.pdf

1、目的：觀察鈷原卟啉誘導肺組織HO-1表達在大鼠體外循環(huán)肺損傷中發(fā)揮的具體作用，并對其作用機制進行分析。
　　方法：Wistar大鼠144只,雄性，隨機分為3組：A組（對照組）、B組（鈷原卟啉,CoPP）、C組[鈷原卟啉（CoPP）+鋅原卟啉（ZnPP）]。建立改良大鼠體外循環(huán)肺損傷模型。A組大鼠腹腔注射生理鹽水（制模前24h）；B組腹腔注射CoPP(5mg/kg)；C組腹腔注射CoPP(5mg/kg)和ZnPP(5mg/kg)。制

2、模成功后采用斷頸法分別于體外循環(huán)前(T0)、體外循環(huán)結束即刻(T1)、體外循環(huán)后2小時(T2)、6小時(T3)、12小時(T4)、24小時(T5)將大鼠處死，每次8只。取肺組織檢測相應的指標。取部分左肺組織檢測濕/干重（W/D）比。用多聚甲醛來固定部分右肺組織，然后用石蠟包埋,以用于HE染色，HO-1、Bcl-2蛋白表達的免疫組化方法測定以及TUNEL檢測細胞凋亡。剩余肺組織置于液氮中凍存?zhèn)溆?，用于檢測肺組織勻漿膽紅素的含量；化學法測定

3、超氧化物岐化酶（SOD）的活性、丙二醛（MDA）含量以及髓過氧化物酶（MPO）、總抗氧化能力(TAOC)的活性；酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測TNF-α表達。
　　結果：B組大鼠肺組織中HO-1蛋白的表達在體外循環(huán)（CPB）開始前后均有明顯增加，其活性測定結果與蛋白表達結果一致，在各時間點均強于A組和C組（P<0.05）。各組大鼠肺組織細胞Bcl-2蛋白的表達在體外循環(huán)前無明顯差異（P>0.05），CPB后Bcl-2蛋白表達逐漸

4、下調(diào)。B組大鼠肺組織Bcl-2蛋白的表達在體外循環(huán)后各時間點均高于A組和C組（P<0.05）。各組大鼠肺組織細胞凋亡指數(shù)（AI）在CPB前無顯著差異，CPB后AI逐漸增加，到T2點增加最明顯，之后逐漸下降。B組大鼠肺組織AI在體外循環(huán)后各時間點均低于A組和C組（P<0.05）。各組大鼠肺組織SOD、MDA、MPO、TAOC在體外循環(huán)前無明顯差異（P>0.05）。各組SOD活性及TAOC在CPB后逐漸下降。B組在體外循環(huán)后各時間點均高于A

5、組和C組（P<0.05）。MDA含量及MPO活性在CPB后逐漸增加，B組在CPB后各時間點均低于A組和C組（P<0.05）。B組大鼠肺組織TNF-α的含量在CPB后各時間點均低于A組和C組（P<0.05）。肺組織W/D比值及肺組織病理觀察到CPB開始后肺組織的損傷逐漸加重，在CPB后2小時損傷最重。A組和C組肺泡腔內(nèi)可見較多血性滲出及明顯的炎性滲出液、炎性細胞廣泛聚集，間質(zhì)水腫。而經(jīng)過CoPP預處理組肺組織，其損傷程度明顯減輕。肺泡間質(zhì)