去勢(shì)下調(diào)小鼠下丘腦弓狀核HAP1表達(dá).pdf

1、亨廷頓蛋白相關(guān)蛋白-1（huntingtin-associated protein 1，HAP1）是第一個(gè)被鑒定的亨廷頓蛋白（huntingtin）結(jié)合蛋白，其功能至今未明。HAP1至少有HAP1A和HAP1B兩種同工異構(gòu)型，兩種HAP1均主要表達(dá)于神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)。在神經(jīng)系統(tǒng)中，HAP1高水平表達(dá)于弓狀核、室周核、正中隆起等在內(nèi)的下丘腦許多核團(tuán)內(nèi)。下丘腦弓狀核、室周核、正中隆起等核團(tuán)含有分泌促性腺激素釋放激素（Gonadotrop

2、hin Releasing Hormone，GnRH）的分泌性神經(jīng)元，GnRH通過(guò)下丘腦-垂體-性腺軸（Hypothalamus- Pituitary gland-Gonad，HPG) 調(diào)節(jié)性腺激素的分泌，性腺分泌的性激素對(duì)下丘腦分泌GnRH的功能具有反饋調(diào)節(jié)作用。HAP1在下丘腦弓狀核、室周核、正中隆起等部位的高水平表達(dá)提示其可能與HPG軸功能有關(guān)。為了揭示HAP1與HPG軸之間的關(guān)系，本研究在另一實(shí)驗(yàn)中觀察到不同性激素水平可明顯改變

3、下丘腦HAP1水平的基礎(chǔ)上，首先分析了下丘腦表達(dá)HAP1的神經(jīng)元與分泌GnRH神經(jīng)元之間的解剖學(xué)關(guān)系，繼而觀察了不同性激素水平對(duì)下丘腦弓狀核、室周核、正中隆起等部位HAP1免疫反應(yīng)性的影響。 免疫組織化學(xué)ABC法觀察顯示，HAP1高水平表達(dá)于下丘腦弓狀核、室周核、正中隆起、室旁核、視上核等部位，而在腹內(nèi)側(cè)核表達(dá)水平較低，HAP1免疫反應(yīng)產(chǎn)物彌散分布在這些部位的神經(jīng)元胞體內(nèi)，也定位在這些區(qū)域的stigmoid小體上。免疫熒光雙標(biāo)顯

4、示，在有GnRH陽(yáng)性神經(jīng)元的區(qū)域，弓狀核內(nèi)HAP1/GnRH雙標(biāo)細(xì)胞較多，室周核和正中隆起內(nèi)極少或無(wú)HAP1/GnRH雙標(biāo)細(xì)胞。 本實(shí)驗(yàn)室的前期工作發(fā)現(xiàn)，去勢(shì)及補(bǔ)充性激素后，下丘腦內(nèi)HAP1在蛋白質(zhì)和mRNA水平均發(fā)生了明顯變化，但這種變化是否局限在與性腺功能調(diào)節(jié)有關(guān)的區(qū)域尚不明確。為此，本研究進(jìn)一步應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察了切除睪丸或卵巢3w后及切除睪丸或卵巢2w補(bǔ)充性激素1w后下丘腦HAP1水平變化的區(qū)域特征。切除睪丸或卵巢

5、3w后，下丘腦弓狀核、室周核和正中隆起的HAP1免疫反應(yīng)性減弱，尤以弓狀核內(nèi)變化最為明顯，而下丘腦其他區(qū)域的HAP1免疫反應(yīng)性無(wú)明顯變化。切除睪丸或卵巢2w補(bǔ)充性激素1w后，下丘腦弓狀核、室周核和正中隆起的HAP1免疫反應(yīng)性與正常水平基本相同，下丘腦其他區(qū)域的HAP1免疫反應(yīng)性與正常水平無(wú)明顯區(qū)別。 HAP1與GnRH均存在于下丘腦弓狀核、室周核、正中隆起。弓狀核內(nèi)有較多的HAP1/GnRH雙標(biāo)細(xì)胞提示，HAP1可能通過(guò)與GnR

6、H的相互作用而參與HPG軸調(diào)節(jié)作用。 性腺切除后，體內(nèi)性激素的分泌減少，對(duì)下丘腦的負(fù)反饋?zhàn)饔脺p弱，下丘腦弓狀核、室周核和正中隆起內(nèi)GnRH的合成和分泌因此而增加。以前的研究表明，HAP1參與或調(diào)節(jié)神經(jīng)元內(nèi)的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、神經(jīng)遞質(zhì)的釋放和受體的再循環(huán)。小鼠下丘腦弓狀核等部位HAP1免疫反應(yīng)性隨著其性激素水平的改變而變化，提示其可能參與下丘腦弓狀核等部位神經(jīng)元內(nèi)GnRH的轉(zhuǎn)運(yùn)和分泌。 性腺切除后，下丘腦弓狀核內(nèi)HAP1免疫反應(yīng)性