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文檔簡(jiǎn)介
1、研究目的:
1.獲得穩(wěn)定,準(zhǔn)確的含PML/RARa和ABL雙基因質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品。
2.建立檢測(cè)PML/RARa和ABL基因雙重?zé)晒舛縋CR方法。
3.開(kāi)發(fā)出可應(yīng)用于臨床急性早幼粒白血病病人PML/RARa基因檢測(cè)試劑盒。
方法:
1.利用RT-PCR從NB4細(xì)胞中擴(kuò)增出ABL基因克隆至質(zhì)粒PCMV4-PML/RARa中(該質(zhì)粒由上海交通大學(xué)血液學(xué)研究所張小偉博士惠贈(zèng))送
2、去測(cè)序。測(cè)序正確后,將重組質(zhì)粒命名為PCMV4-PML/RARa-ABL,并對(duì)質(zhì)粒穩(wěn)定性和反應(yīng)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。
2.構(gòu)建穩(wěn)定的檢測(cè)PML/RARa和ABL基因的單重?zé)晒舛縋CR反應(yīng)體系,同時(shí)在此基礎(chǔ)之上建立穩(wěn)定雙重?zé)晒舛縋CR方法,開(kāi)發(fā)出可應(yīng)用于臨床檢測(cè)白血病病人PML/RARa檢測(cè)的試劑盒。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1.成功構(gòu)建了含PML/RARa和ABL雙基因質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品,用于白血病病人PML/RARa
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