微波輻射高效固定青霉素G?；?pdf

1、青霉素G?；?Penicillin G acylase，簡稱PGA，EC3.5.1.11)廣泛用于酶法制備β-內酰胺抗生素中間體6-氨基青霉烷酸(6-APA)和7-氨基-3-脫乙酰氧基頭孢烷酸(7-ADCA)。該酶還能催化合成多種以6-APA或7-ADCA為母核的半合成青霉素或頭孢菌素。此外，青霉素G?；敢鄳糜谑中曰衔锏牟鸱趾碗念惡铣芍忻摮Ｗo基反應。青霉素G?；赣兄薮蟮墓I(yè)應用價值，但游離酶對反應溫度、pH、有機溶劑等的耐

2、受性較差，且難以回收利用，因此國內外對青霉素G酰化酶的固定化進行了廣泛的研究。
　　 本文通過正硅酸乙酯的水解縮合，合成具有較大孔徑的介孔材料MCFs，再在微波輻射下參照常規(guī)方法將青霉素G?；腹潭ㄔ谄浔砻婕翱椎乐?。以固定化酶相對活力和活力回收為指標，討論了微波輻射功率、加酶量、溫度、時間、pH等不同固定化條件對固定化酶的影響。本文考察對比了游離酶與固定化酶催化水解反應的最適pH值、最適溫度、米氏常數、活性位點數以及固定化酶的熱

3、穩(wěn)定性、連續(xù)操作穩(wěn)定性和貯存穩(wěn)定性。實驗結果如下：
　　 1.制備了粒徑約為300～400nm的介孔材料MCFs，平均孔徑26.06nm，比表面積為331.43m2/g，孔體積及孔徑分布集中，比表面積大。
　　 2.當微波功率為300W，加酶量為60mg/g，固定化溫度為20℃，pH為8.0，時間為140s時，固定化濕酶活力為1191.3U/g，活力回收高達166.7％。與常規(guī)方法相比，微波輔助固定化活力回收提高30％以

4、上，固定化時間由12h大幅縮短至140s。
　　 3.與游離酶相比，青霉素G?；附浳⒉ㄝ椛涔潭ɑ?，活性位點數及其對底物的表觀親和力有所提高，且兩者均略高于常規(guī)方法制備的固定化青霉素G?；?。
　　 4.游離酶和微波輻射固定化酶催化反應的最適pH值分別為8.5和8.0，最適溫度分別為45℃和50℃。固定化酶適用的pH和溫度范圍比游離酶更加廣泛。
　　 5.微波輻射固定化酶具有良好的連續(xù)操作穩(wěn)定性，連續(xù)反應10個