Bacillus subtilis fmbJ產(chǎn)生的脂肽抗微生物效果及安全性評價.pdf

1、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文BacillussubtilisfmbJ產(chǎn)生的脂肽抗微生物效果及安全性評價姓名：黃現(xiàn)青申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：食品科學(xué)指導(dǎo)教師：陸兆新20060901Bacillvasubtilis筋hJ產(chǎn)生的臘肽抗微生物效果及安全性評價期的還是i雋發(fā)期的芽孢均可以不同程度的導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)的異常變化，但對萌發(fā)期芽孢作用效果要強于未萌發(fā)的芽孢；利用吸光度法進行膜通透性研究，未發(fā)現(xiàn)明顯的導(dǎo)致蠟樣茅孢桿菌培養(yǎng)液中有大分子的紫外吸收物質(zhì)的泄

2、漏，但是通過電泳測定可以觀察到有明顯的核酸物質(zhì)的泄漏；體外法研究脂肽扣蠟樣芽孢桿菌染色體相互作用表明其能夠和染色體DNA體外結(jié)合導(dǎo)致染色體DNA最大吸收峰的改變并產(chǎn)生減色效應(yīng)及增色效應(yīng)經(jīng)響應(yīng)曲面法優(yōu)化后，在溫度為296℃，作用時間為76h、濃度為346mg／mL的情況下可以將基質(zhì)中的蠟樣芽孢桿菌芽孢降低2個數(shù)量級。3該脂肽對點青霉抑制活性研究表明：點青霉對其具有較高的敏感性，最小抑茵濃度為125Itg／mL，能夠較強的抑制點青霉的的生長

3、繁殖及其孢子萌發(fā)；掃描電鏡和透射電鏡顯微結(jié)構(gòu)顯示其對點青霉孢子具有溶解作用；并且可以顯著降低琥珀酸脫氫酶、蘋果酸脫氫酶活性此外，當脂肽作用于點青霉不同時間后可以導(dǎo)致細胞營養(yǎng)物質(zhì)的吸收受阻或停止4利用體外培養(yǎng)的方法研究了該脂肽抗偽狂犬痛病毒、豬細小病毒南京株、新城疫病毒lasota株、傳染性法式囊病病毒H株的作用效果，并對其可能的作用途徑進行了探討結(jié)果表明脂肽對P[15細胞和CEF細胞的TDso分別為4757pg／mL12895pg／mL

4、；TDo分別為189pg／mL、257999／mL；對PRV株P(guān)PV南京株，NDVIasota株、IBDVH株所致細胞病變效應(yīng)有明顯的抑制作用，可使細胞存活率顯著升高(p005)：對PRV株，PPV南京株，NDYlasota株、IBDVH株均有不同程度的鈍化作用，并且對NDVlasota株，IBDVH株還具有一定的預(yù)防感染及抑制復(fù)制的作用：但是對于預(yù)防PRV株、PPV南京株在P卜15細胞上的感染及復(fù)制沒有抑制作用。5研究了該抗脂肽的食品

5、安全性，為其應(yīng)用提供了毒理學(xué)安全依據(jù)。依據(jù)GBl5193—94強食品安全性毒理學(xué)評價程序和方法》進行急性毒性實驗和30天喂養(yǎng)實驗結(jié)果表明昆明種小鼠一次經(jīng)口灌胃量這59／kg腓，經(jīng)一周飼喂觀察未見有死亡和明顯的表觀中毒癥狀，屠宰觀察肝臟脾臟、腎臟未見有毒理性或病理性病變，肝臟指數(shù)，脾臟指數(shù)、腎臟指數(shù)也沒有明顯差異，但是在高劑量(大于19／kgBW)時會對小鼠生長產(chǎn)生影響Wistar大鼠30天喂養(yǎng)實驗結(jié)果表明，在劑量為250mg／kg體重的